摘要目的 利用超高效液相色谱-串联质谱技术(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)鉴定海巴戟天化学成分,进一步实验验证海巴戟天调控 miR-223-3p/NLRP3 信号通路抑制多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠炎症反应.方法 采用UPLC-MS/MS分析海巴戟天化学成分.动物实验:SD雌性大鼠采用随机数字表分为 3 组:正常对照组(n=5)、PCOS模型组(n=5)和海巴戟天灌胃组(n=5).HE染色观察大鼠卵巢组织学形态,ELISA方法测定大鼠睾酮(testosterone,T)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、白细胞介素(interleukin,IL)表达水平,RT-qPCR法检测大鼠miR-223-3p、NLRP3 的mRNA表达,Western blot法检测大鼠NLRP3 的蛋白表达.结果 UPLC-MS/MS鉴定出海巴戟天化学成分有641 种,包括木犀草素、芹菜素、大黄素等多种成分.与正常对照组比较,PCOS 模型组卵巢颗粒细胞层数减少,卵泡囊性扩张,闭锁卵泡增多,T、LH水平升高(P<0.05),FSH水平降低(P<0.05),IL-18、IL-1β水平升高(P<0.05),卵巢组织miR-223-3p mRNA表达降低(P<0.01),NLRP3 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01);与PCOS模型组相比,海巴戟天灌胃组各级卵泡比例正常,颗粒细胞层数增多,T、LH水平降低(P<0.05),FSH水平升高(P<0.05),IL-18、IL-1β水平降低(P<0.05),卵巢组织miR-223-3p mRNA表达升高(P<0.05),NLRP3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05).结论 海巴戟天能够改善PCOS大鼠卵巢病理状态,改变异常性激素及降低IL-18、IL-1β水平,其机制可能是通过调控miR-223-3p/NLRP3 信号通路抑制PCOS大鼠炎症反应.
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