摘要目的 探讨靶向细胞间质上皮转化因子(cellular-mesenchymal epithelial transition factor,c-Met)的嵌合抗原受体NK(chimeric antigen receptor-NK,CAR-NK)细胞在体外对胃癌细胞的抑制和杀伤作用.方法 采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)、蛋白质免疫印迹法、反转录荧光定量聚合酶链反应检测胃癌细胞株(MKN-45、GTL-16和NCI-N87)和胃黏膜上皮细胞GES-1中c-Met的蛋白和核酸水平表达情况;通过细胞免疫荧光实验检测c-Met CAR对高表达c-Met的胃癌细胞株GTL-16的特异性识别作用;通过慢病毒载体构建靶向c-Met的CAR-NK细胞,并应用FCM检测CAR-NK细胞的感染效率和细胞表型;通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)实验和酶联免疫吸附试验检测c-Met CAR-NK细胞对胃癌细胞株和胃黏膜上皮细胞的杀伤效应.结果 在核酸水平和蛋白水平,c-Met均显著高表达于胃癌细胞株GTL-16和MKN-45,低表达于胃癌细胞株NCI-N87和胃黏膜上皮细胞GES-1.FCM结果显示c-Met CAR-NK感染率为(14.97±0.25)％,c-Met CAR病毒感染并未影响NK-92细胞的表型.细胞免疫荧光结果显示转染c-Met CAR质粒的Lenti X-293T细胞靶向结合至胃癌细胞GTL-16周围.LDH杀伤实验结果表明,c-Met CAR-NK相较于NK-92对高表达c-Met的胃癌细胞株GTL-16和MKN-45具有更显著的杀伤效果(P＜0.05).按照效靶比10∶1时c-Met CAR-NK与高表达c-Met的胃癌细胞株GTL-16和MKN-45共培养时,可显著释放出更多的肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和干扰素(interferon,IFN)-γ(P＜0.05).结论 本研究构建的c-Met CAR-NK细胞具有特异性识别并靶向杀伤高表达c-Met的胃癌细胞的能力,且有较强的杀伤效应功能,能释放出更多的TNF-α和IFN-γ.