摘要目的 探讨蔓性千斤拔素A通过细胞外调节蛋白激酶(ERK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对非小细胞肺癌细胞自噬的影响.方法 将A549细胞分为对照组及蔓性千斤拔素A低、中、高浓度(20、25、30μmol·L-1)组或对照组、蔓性千斤拔素A30μmol·L-1、SCH772984 10μmo1·L-1+蔓性千斤拔素A30 μmol·L-1和SCH772984 10 μmol·L-1浓度组,对照组细胞培养液为含1％胎牛血清的RMPI 1640培养基,其余各组分别加入蔓性千斤拔素A或SCH772984(预处理细胞1h)使达到相应浓度,连续培养12h.MTT法检测细胞活力;细胞集落形成实验检测细胞集落形成的情况:细胞自噬染色检测试剂盒检测细胞内自噬的情况;免疫荧光检测细胞内LC3B蛋白表达水平的变化;Western blotting实验检测细胞内磷酸化的细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶标(p-mTOR)、自噬相关蛋白Beclin 1(Beclin1)、螯合体1(P62)蛋白表达水平的变化.结果 与对照组比较,MTT法检测结果显示各浓度(20、25、30μmol·L-1)蔓性千斤拔素A能够显著抑制A549细胞活力(P＜0.05、0.001),SCH772948(10μmol·L-1)能够显著逆转蔓性千斤拔素A诱导的A549细胞死亡(P＜0.01);细胞集落形成实验显示20、25、30 μmol·L-1蔓性千斤拔素A能显著抑制A549细胞集落的形成(P＜0.001);细胞自噬染色检测试剂盒结果显示20、25、30 μmol·L-1蔓性千斤拔素A能显著抑制A549细胞自噬,SCH772948 10 μmol L-1能够显著逆转蔓性千斤拔素A介导的A549细胞自噬抑制;免疫荧光结果显示蔓性千斤拔素A 30 μmol·L-1能够显著减弱LC3B的荧光,SCH772948 10 μmol·L-1能够显著逆转蔓性千斤拔素A导致的LC3B荧光减弱;Western blotting实验结果表明,20、25、30 μmol·L-1蔓性千斤拔素A能够使A549细胞内p-ERK、p-mTOR、P62蛋白表达水平显著升高及Beclin 1蛋白表达水平显著降低(P＜0.001),SCH772948 10 μmol·L-1能够显著逆转蔓性千斤拔素A导致的A549细胞内p-ERK、p-mTOR、P62蛋白表达水平升高及Beclin 1蛋白降低(P＜0.001).结论 蔓性千斤拔素A可通过ERK/mTOR通路抑制非小细胞肺癌细胞自噬并导致细胞死亡.