淫羊藿苷调控TGF-β1诱导的DNA高甲基化抑制5/6肾切除大鼠肾间质肌成纤维细胞增殖研究

Icariin inhibits myofibroblasts proliferation and attenuates renal fibrosis in 5/6 nephrectomized rats

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摘要目的观察淫羊藿苷对5/6肾切除大鼠肾间质肌成纤维细胞增殖的影响,并探讨其作用机制.方法将大鼠分为假手术组、模型组及淫羊藿苷高、低剂量(100、50mg·kg-1)组.假手术组仅分离肾包膜,模型组及淫羊藿苷高、低剂量组进行5/6肾切术,每组7只.术后第3周开始给药,每日1次.14周末留取大鼠血清,检测肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);取部分肾脏,苏木精-伊红(HE)染色法常规病理检查观察组织学改变;天狼星红染色检测肾间质纤维化;免疫组织化学法检测肾脏组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、大鼠磷酸化信号转导分子2/3(p-SMAD2/3)、DNA甲基转移酶3A(Dnmt3a)的表达,另部分肾脏冻存,Western blotting检测α-SMA、TGF-β1、和Dnmt3a蛋白表达.结果 HE染色及天狼星红染色结果显示模型组大鼠肾小管扩张或萎缩,有大量纤维组织增生及胶原沉积,并见散在炎症细胞浸润.免疫组化结果显示模型组肌成纤维细胞标记物α-SMA表达明显升高,促纤维化因子TGF-β1及其下游分子p-Smad2/3表达明显增加;DNA甲基转移酶Dnmt3a表达明显升高.淫羊藿苷处理可以减轻肾脏病理损伤,抑制肌成纤维细胞异常增殖,改善肾间质纤维化,下调α-SMA、TGF-β1、p-Smad2/3和Dnmt3a表达.除淫羊藿苷高剂量组抑制Dnmt3a表达的效应强于淫羊藿苷低剂量组外,其余指标淫羊藿苷高剂量组和低剂量组效应差异不明显.结论淫羊藿苷在5/6肾切除诱导的慢性肾病(CKD)大鼠中表现出抗纤维化作用,其机制可能是通过调控TGF-β1诱导的DNA高甲基化抑制肌成纤维细胞增殖,改善肾间质纤维化.