基于"组分-药效"关系研究木芙蓉叶体外抗脂多糖诱导的急性乳腺炎作用
In vitro anti-LPS-induced acute mastitis effect of Hibiscus mutabilis leaves studied based on"component-efficacy"relationship
摘要目的 为了提高木芙蓉Hibiscus mutabilis叶的临床疗效,对其有效组分进行配伍研究并建立设计空间,为制剂成型工艺研究奠定基础.方法 体外培养牛乳腺上皮细胞(BMEC),以CCK-8法检测的细胞存活率和试剂盒法检测的肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β分泌量为指标,筛选脂多糖(LPS)造模的适宜浓度及时间;应用建立的BMEC细胞的LPS模型,以细胞存活率和TNF-α、IL-1β分泌量为指标,筛选出木芙蓉叶抗急性乳腺炎有效组分——芦丁、异槲皮苷、槲皮素、山柰酚、金丝桃苷的最佳配伍组合;以细胞存活率为指标,采用单因素实验初步筛选最佳组合成分中芦丁、异槲皮苷、山柰酚抗LPS诱导BMEC细胞的有效给药浓度;通过Box-Behnken设计建立模型,采用多指标叠加法建立芦丁、异槲皮苷、山柰酚抗LPS诱导BMEC细胞的设计空间,并以细胞存活率和细胞上清中TNF-α、IL-1β、IL-6含量为指标,对随机的选取空间点内和点外进行验证,筛选出给药浓度.结果 10μg·mL-1LPS刺激BMEC细胞24h制备模型;木芙蓉叶抗急性乳腺炎有效组分的最佳配伍组合为芦丁、异槲皮苷和山柰酚3个成分;建立的设计空间芦丁的质量浓度为96~104 μg·mL-1、异槲皮苷的质量浓度为45~54μg·mL-1、山柰酚的质量浓度为4.5~6.5 μg·mL-1,经验证,在此空间内的点均在所设的预测范围内.结论 成功筛选出木芙蓉叶有效组分的最佳配伍,且建立的设计空间工艺稳定可靠.
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