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DNA未知片段APCR克隆的优化

Optimization of APCR for Unknown DNA Fragment Cloning

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学术成果认领

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摘要用锚定PCR(APCR)技术对未知的小麦淀粉合成关键酶基因gbss Ⅰ和sbeⅡa启动子序列进行扩增.通过对APCR反应进行优化,获得了gbssⅠ启动子序列(4.1kb)和sbeⅡa启动子序列(3.1kb).结果表明:减少模板加入量(由1μL降低至1/100μL)和增大反应体积(由50μL增到100μL)均可在一定程度上减少非特异的结果出现;升高变性温度(由94℃提高到98℃)和延伸温度(由55℃提高到72℃)并延长延伸时间则能有效地消除APCR中的非特异性条带.

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作者苗红梅 ^[1] 岳彩鹏 ^[2] 赵永英 ^[1] 学术成果认领

作者单位河南省农业科学院生物技术研究所,郑州,450002 ^[1] 郑州大学生物工程系,郑州,450052 ^[2]

关键词 APCR DNA未知片段小麦启动子序列

主题词小麦属(Triticum)淀粉合酶(Starch Synthase)温度(Temperature)淀粉(Starch)基因(Genes)

分类号 Q94

栏目名称 技术与方法

发布时间 2005-10-13

基金项目

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2005年41卷4期

509-512页

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