摘要开花是植物由营养生长向生殖生长的转换点,该过程受内源基因与环境信号共同调控。FLC(Flowering locus C)和SVP(Short vegetative phase)是开花途径中关键的抑制开花因子。本文利用酵母双杂交技术深入研究白桦开花抑制因子FLC与SVP的自身聚合作用的分子机理。从重组质粒pGBKT7-BpFLC、pGBKT7-BpSVP分别克隆出6个BpFLC截短体[Bp-FLC1(aa1~73)、BpFLC2(aa1~173)、BpFLC3(aa74~173)、BpFLC4(aa60~208)、BpFLC5(aa74~208)和BpFLC6(aa174~208)]和6个BpSVP截短体[BpSVP1(aa1~68)、BpSVP2(aa1~172)、BpSVP3(aa69~172)、BpSVP4(aa60~225)、BpSVP5(aa69~225)和BpSVP6(aa173~225)],分别编码MADS型蛋白的MI、MIK、K、IKC、KC和C域。在酵母Y2HGold菌中,分别共转质粒pGBKT7-BpFLC1~6×pGADT7-BpFLC及pGBKT7-BpSVP×pGADT7-BpSVP1~6。酵母转化子Y2HGold [pGBKT7-BpFLC×pGADT7-BpFLC]、Y2HGold [pGBKT7-BpFLC2~5×pGADT7-BpFLC],可在选择性固体培养基TDO (SD/-Leu/-Trp/-His)、QTO/A (SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/AbA)上生长,并在QDO/A/X (SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/AbA/X-α-gal)上长出蓝色菌落,表明BpFLC能与自身及截短体蛋白BpFLC2~5同源结合。此外酵母Y2HGold [pGBKT7-BpSVP×p-GADT7-BpSVP]、Y2HGold [pGBKT7-BpSVP×pGADT7-BpSVP2~5]也能同时激活报告基因AUR1-C、HIS3、ADE2、MEL1,说明BpSVP能与自身及截短体蛋白BpSVP2~5同源结合。对保守区的序列结构进一步分析发现： BpFLC与BpSVP的K域是它们能够同源结合,介导BpFLC与BpSVP自身形成同源二聚体的关键。