换一批
换一批黄芪UGPase cDNA克隆、分析及其在大肠杆菌中的表达
UGPase of Astragalus membranaceus :cDNA Cloning,Analyzing and Expressing in Escherichia coli
摘要在已报道的UGPase的植物cDNA序列基础上,从膜荚黄芪( Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge)毛状根中分离了此酶的cDNA.此cDNA全长为1 831 bp,推测编码分子量为51.5 kD、等电点为6.01的由471个氨基酸残基组成的多肽.将此cDNA的开放阅读框载入质粒pET28(a)+并转入大肠杆菌( Escherichia coli ) BL21.SDS-PAGE表明此酶已经在 E.coli 中获得大量表达,表达量约为总细菌蛋白的40%.酶活分析表明,转化菌中UGPase 的活性比非转化菌高0.50～3.27倍,证明此cDNA可以在原核生物中获得表达.Northern blot表明UGPase在黄芪的根、茎、叶及毛状根中均有表达,在根及毛状根中表达量较高,证明了此酶主要分布于植物贮藏组织的报道.
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关键词
原核表达cDNA克隆UGPase毛状根膜荚黄芪prokaryotic expressioncDNA cloningUGPasehairy rootAstragalus membranaceus
分类号
Q943.2
栏目名称
研究论文
DOI
10.3321/j.issn:1672-9072.2002.06.010
发布时间
2005-11-03
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