换一批杜氏盐藻外源基因稳定表达系统的构建
Construction of a System for the Stable Expression of Foreign Genes in Dunaliella salina
摘要建立了一种单细胞海水绿藻--杜氏盐藻(Dunaliella salina Teod.)的外源基因稳定表达系统.通过电激法将携带乙肝病毒表面抗原基因(HBsAg)和氯霉素乙酰转移酶基因(CAT)的质粒转入盐藻细胞内,CAT基因为筛选基因.PCR和Southern杂交结果显示,HBsAg基因已经整合到盐藻基因组中.Northern杂交结果表明,转化成功细胞内的该基因已转录成mRNA.HBsAgELISA和Western杂交检测证明,HBsAg蛋白在转化的盐藻细胞内稳定地表达.同时,PCR和Southern杂交显示,CAT基因也已整合到盐藻基因组中.且CATELISA检测证明,CAT蛋白在转化体中也已稳定地表达.进一步对转化盐藻进行无氯霉素筛选培养,60代后,HBsAg基因依然稳定地存在并表达.本实验第一次报道了外源基因在杜氏盐藻细胞内的稳定表达.
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关键词
杜氏盐藻乙肝病毒表面抗原氯霉素乙酰转移酶Dunaliella salinahepatitis B surface antigenchloramphenicol acetyltransferase
医学主题词
基因(Genes)病毒(Viruses)抗原, 表面(Antigens, Surface)氯霉素O-乙酰转移酶(Chloramphenicol O-Acetyltransferase)细胞(Cells)
分类号
Q943.2（植物细胞遗传学）
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1672-9072.2004.03.013
发布时间
2004-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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