换一批
换一批玉米根V-ATPase的A亚基磷酸化位点的鉴定
Identification of the Phosphorylation Site of the V-ATPase Subunit A in Maize Roots
摘要以玉米(Zea mays L)根的高纯度液泡膜为材料进行的磷酸化反应表明,液泡膜蛋白的磷酸化可明显提高v型H+-ATPase(V-ATPase)的ATP水解活性和H+转运活性.进一步研究表明,纯化的液泡膜蛋白能被硫代磷酸化,用V-ATPase的A亚基抗体将一条约69 kD的条带鉴定为A亚基.为了测定V-ATPase的A亚基的磷酸化位点,从硫代磷酸化的凝胶中切下A亚基条带并用胰蛋白酶彻底消化.用RP-HPLC分离纯化酶解片断,收集纯化的硫代磷酸化肽段进行质谱分析所测定的分子量为573.83 Da.A亚基胰蛋白酶彻底消化后能产生61个肽段,只有F56肽段的分子量573.66 Da与573.83 Da最接近,而且F56肽段上只有第525位的丝氨酸可以被磷酸化.因此可以确定,玉米根V-AT-Pase A亚基的潜在磷酸化位点为Ser525.就我们所知,这是首次确定植物V-ATPase A亚基的磷酸化位点.
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分类号
Q945
栏目名称
发育与分子生物学
DOI
10.3321/j.issn:1672-9072.2004.04.007
发布时间
2004-06-25
基金项目
国家重点基础研究发展计划(973计划)
国家自然科学基金
高等学校博士学科点专项科研项目
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