紫花苜蓿MsDGK5基因的克隆及耐盐功能分析
Cloning and Functional Analysis of Salt Tolerance in the MsDGK5 Gene from Medicago sativa
摘要盐胁迫作为典型的非生物胁迫类型,已成为限制植物生长发育的核心因素之一.二酰基甘油激酶DGKs(Diacylglycerol kinases)是一种信号酶,可通过磷酸化二酰基甘油形成磷脂酸,在应对非生物胁迫过程中起关键作用.通过克隆紫花苜蓿MsDGK5基因,构建pCAMBIA3301-MsDGK5超表达载体,使用花序侵染法遗传转化拟南芥,获得过表达MsDGKS基因的拟南芥植株并进行功能验证.结果表明,MsDGK5基因的全长序列为1428 bp,可编码475个氨基酸;MsDGK5蛋白与蒺藜苜蓿MtDGK5蛋白亲缘关系最近;MsDGK5基因受到盐胁迫的显著诱导,在根中的表达量于处理后48 h升至最高;转MsDGK5基因拟南芥对盐胁迫的耐受能力明显增强,表现为过表达拟南芥的鲜重、存活率和总叶绿素含量均显著高于对照,相对电导率显著低于对照.研究发现,MsDGK5基因过表达可显著增强拟南芥的耐盐性,该结果为系统解析紫花苜蓿MsDGK5基因功能及盐胁迫应答分子机制提供了重要理论依据,为紫花苜蓿耐盐遗传改良选育奠定了分子基础.
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