青钱柳法呢基焦磷酸合成酶基因的克隆及功能研究
Molecular Cloning and Functional Analysis of a Gene Encoding Farnesyl Diphosphate Synthase from Cyclocarya paliurus
摘要青钱柳是集药用、材用和观赏等多种价值于一身的珍贵树种.法呢基焦磷酸合成酶(FPS)催化牻牛儿基焦磷酸(GPP)与异戊烯基焦磷酸(IPP)缩合成法呢基焦磷酸(FPP),FPP是植物次生代谢产物倍半萜,三萜,甾醇等的前体.本研究通过RACE方法首次从青钱柳中扩增了法呢基焦磷酸合成酶的全长cDNA序列,序列命名为CpFPS(Genbank登录号为GU121224),序列长度为1420bp,包含1029bp的开放阅读框,编码342个氨基酸残基,预测蛋白分子量为39.60kDa.通过BlASTP分析,推断的青钱柳FPS蛋白序列与木本棉(Gossypium arboreum)(CAA72793.1)、橡胶树(Hevea brasiliensis)(BAF98301)等的FPS蛋白相似度较高.蛋白质保守区、特征区以及进化树分析初步证实扩增到的全长cDNA序列为青钱柳的FPS基因.将该基因连入酵母表达载体并转入麦角甾醇缺陷型酵母菌株CC25(MATa/MATalpha,deltaERG20/+),发现该基因可弥补营养缺陷使得CC25菌株在高温中正常生长,证明所得到的青钱柳CpFPS基因编码的蛋白是有功能的蛋白.
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