换一批
换一批香蕉束顶病毒nsp酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活验证
Construction and Identification of Bait Vector Containing BBTV nsp Gene in Yeast Two-hybrid System
摘要香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)DNA6编码的核穿梭蛋白(nuclear shuttle protein,NSP)在病毒的侵染、复制、运输中起重要作用.为了利用酵母双杂交系统研究BBTV DNA6与寄主香蕉蛋白的互作,本实验利用两对引物的PCR扩增得到BBTV nsp片段,混合各自PCR产物进行熔化退火可得到1/4两端含有EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ的酶切位点序列的DNA产物,将目的片段连接到酵母双杂交系统的pGBKT7诱饵载体中,成功获得pGBKT7-nsp,并将重组质粒pGBKT7-nsp转化入Y2H Gold酵母菌株中进行毒性检测和自激活验证.结果表明,pGBKT7-nsp没有自激活活性,同时对酵母细胞也无毒性,符合酵母双杂交诱饵质粒的要求,可用于下一步的蛋白互作实验.
更多相关知识
关键词
香蕉束顶病毒nsp基因酵母双杂交诱饵载体自激活banana bunchy top virus (BBTV)nsp genesyeast two-hybridbait vectorself-activation
分类号
S668.1
栏目名称
DOI
10.7525/j.issn.1673-5102.2015.05.017
发布时间
2015-10-16
- 浏览59
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
