换一批
换一批川西獐牙菜SmSLS2基因的克隆、生物信息学及表达分析
Cloning, Bioinformatics and Expression of SmSLS2 Gene in Swertia mussotii
摘要裂环马钱子苷合成酶(SLS)是环烯醚萜类化合物合成途径的限速酶.该研究根据川西獐牙菜转录组信息获得SmSLS2基因序列,对该基因进行克隆、生物信息分析、原核表达载体构建及蛋白体外诱导.结果 表明SmSLS2cDNA全长1 566 bp(GenBank编号MH535904),编码521个氨基酸,推测其蛋白相对分子质量为59.79kDa,等电点为8.92.结构域分析表明SmSLS2含一个跨膜结构域,SmSLS2的gDNA全长为2 576 bp,含5个外显子和4个内含子.SmSLS2蛋白与其他植物中SLS蛋白具有高度的相似性.进一步将SmSLS2构建到原核表达载体pET-28a-sumo上,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,在37cC、0.5 mmol·L-1 IPTG条件下进行原核表达,诱导出与预测蛋白大小一致的目的蛋白.该研究成功从川西獐牙菜中克隆了SmSLS2,为进一步阐明该基因在环烯醚萜合成途径中的作用和通过基因工程手段改良环烯醚萜类化合物产量提供了理论基础.
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分类号
Q949.776.4
栏目名称
DOI
10.7525/j.issn.1673-5102.2019.03.013
发布时间
2019-06-12
基金项目
河北省高等学校科学技术研究青年基金项目（QN2018017）；
天津市自然科学基金（18JCQNJC14000）
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