EN2沉默对肝癌HepG2细胞凋亡以及PTEN/PI3K/Akt信号通路的影响

Effect of EN2 silencing on Apoptosis and PTEN/PI3 K/Akt signaling pathway in hepatocellular carcinoma HepG2 cells

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摘要目的:探究RNA干扰技术(RNAi)沉默Engrailed-2基因(EN2)后对肝癌HepG2细胞凋亡影响以及10号染色体上缺失的磷酸酯酶和张力蛋白同源基因/磷脂酰肌醇激/蛋白激酶B信号通路(PTEN/PI3K/Akt)信号通路的影响.方法:将NC-siRNA、EN2-siRNA的质粒载体分别转染HepG2细胞,转染后分为空白对照组(Control组)、阴性转染组(NC-siRNA组)、EN2-siRNA组,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制情况;平板细胞克隆形成实验检测HepG2细胞克隆形成数量;流式细胞术检测EN2沉默后细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(WB)检测PTEN/PI3K/Akt蛋白表达情况.结果:EN2-siRNA组24 h、36 h、48 h、72 h细胞增殖抑制率、凋亡率均显著高于Control组和NC-siRNA组,细胞克隆数量形成数目显著低于Control组和NC-siRNA组;EN2-siRNA组细胞G1期细胞比例显著高于Control组、NC-siRNA组,S期细胞比例显著低于Control组、NC-siRNA组(P<0.05).EN2-siRNA组细胞EN2、p-PI3K、p-Akt蛋白表达显著低于Control组、NC-siRNA组,PTEN蛋白高于Control组、NC-siRNA组(P<0.05).结论:EN2在肝癌HepG2细胞中高表达,沉默EN2表达后,可抑制HepG2细胞增殖,促进凋亡,推测其机制可能与上调PTEN蛋白表达、抑制PI3K/Akt通路有关.