乙型肝炎表面抗原基因植物高效表达载体的构建
Construction of a plant effective expression vector containing the gene of hepatitis B virus surface antigen
摘要目的:构建果实特异性启动子驱动的含乙肝表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)植物表达载体,进一步提高外源目的基因的表达量,为研制有效的转基因植物防乙肝病毒疫苗打下基础.方法:将番茄果实特异性启动子基因2A12和E8,分别插入到pBPFΩ7构建中间载体pB2A12和pBE8;酶切YEP-HBs载体中的HBsAg小蛋白,并插入到pB2A12和pBE8,得到载体pB2A12-HBs和pBE8-HBs;将其中"p35S+2A12+Ω+HBsAg-s+Tnos"片段和"p35S+E8+Ω+HBsAg-s+Tnos"片段分别亚克隆到pCAMBIA1301,得到植物表达载体pCAM2A12-HBs和pCAME8-HBs.测序鉴定pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs中的启动子和HBsAg片段.最后将pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs转化根癌农杆菌EHA105.结果:重组质粒用酶切鉴定均得到预期片段,pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs的测序结果正确.结论:本实验成功构建了番茄果实特异性启动子和CaMV35S组成型启动子共同驱动HBsAg基因的植物表达载体.
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