上调lncRNA MEG3对大鼠心肌细胞系缺氧/复氧损伤的影响

Effect of Up-regulated lncRNA MEG3 on Hypoxia/Reoxygenation Injury of Rats Myocardial Cell Lines

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摘要目的:探究长链非编码 RNA(lncRNA)母系表达基因 3(MEG3)对大鼠心肌 H9c2细胞缺氧/复氧(H/R)的保护作用及其与核因子 E2相关因子 2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)通路的关系.方法:将 H9c2 细胞分为 Control组、H/R组、H/R+Ad-绿色荧光蛋白(GFP)组、H/R+Ad-MEG3组、H/R+Ad-MEG3+si-NC组及 H/R+Ad-MEG3+si-Nrf2 组.实时荧光定量逆转录酶聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测 MEG3表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)法检测活性氧(ROS)水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;蛋白质印迹(Western Blot)检测 Nrf2/ARE通路相关蛋白表达.结果:与 Control组比较,H/R组细胞凋亡率、细胞中 ROS水平及 Nrf2、血红素氧化酶 1(HO-1)和醌氧化还原酶-1(NQO-1)蛋白水平均增高,而细胞活力、细胞中 MEG3表达水平、SOD和CAT 活性均降低(P<0.05).MEG3过表达可部分逆转 H/R对 H9c2细胞和 Nrf2/ARE通路蛋白的影响(P<0.05);敲低 Nrf2 可削弱 MEG3 过表达对 H/R损伤的保护作用(P<0.05).结论:MEG3过表达可抑制氧化应激和细胞凋亡减轻H/R心肌损伤,可能与激活Nrf2/ARE抗氧化信号有关.