基于lncRNA MALAT1探讨miR-30c/Runx2对冠心病血管钙化的作用研究
Effect of miR-30c/Runx2 on Vascular Calcification in Coronary Heart Disease Based on lncRNA MALAT1
摘要目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)通过miR-30c/矮子相关转录因子2(Runx2)通路对冠心病血管钙化的作用.方法:在体外诱导人血管平滑肌细胞(VSMCs)形成血管钙化模型.采用茜素红S染色、钙含量测定和蛋白研究检测Runx2和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA).通过敲低MALAT1和上调MALAT1、miR-30c和Runx2来确定其对VSMCs钙化的影响.采用双荧光素酶报告法确认MALAT1与miR-30c或miR-30c与Runx2之间的关系.此外,采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法检测基因和蛋白的表达.结果:钙化VSMCs中MALAT1升高,miR-30c降低,MALAT1基因敲低抑制VSMCs钙化,MALAT1的上调促进了 VSMCs的钙化,MALAT1过表达对VSMCs钙化的影响可通过上调miR-30c逆转,而上调Runx2再次逆转,双荧光素酶报告实验证实MALAT1与miR-30c之间存在直接相互作用,Runx2是miR-30c的直接靶点.结论:MALAT1过表达促进VSMC钙化,部分是通过调节miR-30c/Runx2轴实现的.
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