川陈皮素调节TRPV1信号通路对OGD/R诱导的神经细胞凋亡的影响
The Effect of Nobiletin on TRPV1 Signaling Pathway in Regulating OGD/R-induced Apoptosis of Neural Cells
摘要目的:探讨川陈皮素(NOB)调节瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)信号通路对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的神经细胞凋亡的影响.方法:原代培养PC12细胞,建立OGD/R损伤模型,以0、10、20、30、40、50、60 μmol/mL的NOB处理OGD/R诱导的PC12细胞后采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞存活率,筛选NOB最佳作用浓度.将体外培养的PC12细胞随机分为对照组(不作处理)、OGD/R组(OGD/R干预PC12细胞)、OGD/R+NOB组(OGD/R+50 μmol/mL NOB共同干预PC12细胞)、为GD/R+NOB+RTX(TRPV1激活剂)组(OGD/R+50 μmol/mL NOB+10 nmol/L RTX共同干预PC12细胞).采用MTT实验、流式细胞术对各组细胞存活率与凋亡率进行检测;试剂盒法检测PC12细胞乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测TRPV1、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达.结果:与对照组比较,OGD/R组PC12细胞存活率、SOD、GSH水平、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与OGD/R组比较,OGD/R+NOB组PC12细胞存活率、SOD、GSH水平、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05);与OGD/R+NOB组比较,OGD/R+NOB+RTX组PC12细胞存活率、SOD、GSH水平、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05).与对照组比较,OGD/R组PC12细胞凋亡率、LDH、MDA、TNF-α水平、TRPV1、Bax蛋白表达升高(P<0.05);与OGD/R组比较,OGD/R+NOB组PC12细胞凋亡率、LDH、MDA、TNF-α水平、TRPV1、Bax蛋白表达降低(P<0.05);与OGD/R+NOB组比较,OGD/R+NOB+RTX组PC12细胞凋亡率、LDH、MDA、TNF-α水平、TRPV1、Bax蛋白表达升高(P<0.05).结论:NOB可通过抑制TRPV1信号通路激活进而降低OGD/R诱导的炎性反应及氧化应激水平,减轻OGD/R诱导的PC12细胞凋亡.
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