换一批基于MLPA结合熔解曲线法鉴别山药及其常见混伪品
Identification of Dioscoreae Rhizoma and Common Adulterants Based on MLPA Combined with Melting Curve Method
摘要目的:利用MLPA技术结合熔解曲线法建立一种能鉴别山药及其常见混伪品的新方法.方法:以山药、参薯、木薯、番薯为研究对象,针对四个物种的matK序列分别设计MLPA特异性探针,通过DNA变性、杂交、连接、扩增及熔解反应等步骤,建立MLPA-熔解曲线鉴别体系,利用各样品熔解曲线中特异性峰(Tm值)的差异实现不同物种的鉴定.结果:27份样品中,山药Tm值为78.3 ℃,参薯Tm值为79.9℃,木薯Tm值为81.2℃,番薯Tm值为82.9℃,且相互之间没有交叉干扰.该法对山药、参薯、木薯、番薯各自单独的最低检测限为0.1 ng/μL;对相互混淆掺伪的最低有效检出率为5％.27份样品的检测结果均与测序结果一致.结论:MLPA技术结合熔解曲线法具有特异性强、灵敏度高、操作简单等优点,具有进一步推广应用的潜力.
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关键词
山药多重连接探针扩增技术熔解曲线matK鉴别Dioscoreae RhizomaMultiplex ligation-dependent probe amplification(MLPA)Melting curvematKIdentify
分类号
R282.71（中药学）
栏目名称
DOI
10.13863/j.issn1001-4454.2024.02.010
发布时间
2024-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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