益肾健脾通络方调节Th17/Treg失衡改善DKD小鼠肾损伤的作用机制研究
Study on the Mechanism of Yishen Jianpi Tongluo Prescription Regulating Th17/Treg Imbalance to Improve Kidney Injury in DKD Mice
摘要目的:探讨益肾健脾通络方对糖尿病肾脏病(DKD)小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡及Notch信号通路的影响.方法:SPF级雄性C57BL/6N小鼠60只,随机选取10只为正常对照组,剩余50只小鼠腹腔注射链脲佐菌素构建DKD小鼠模型.将造模成功的小鼠随机分为5组,分别为模型组、厄贝沙坦(25 mg/kg)组及益肾健脾通络方高(生药5.2 g/kg)、中(生药2.6 g/kg)、低(生药1.3 g/kg)剂量组.各组小鼠均每天固定时间灌胃给药,连续12 w,正常对照组和模型组灌胃相应体积生理盐水.生化分析仪检测各组小鼠FBG、HbA1c、TC、LDL、Scr、BUN及尿液中mALB、UTP水平;通过HE、Masson、PAS染色观察小鼠肾组织病理学变化;ELISA检测血清NGAL、Lp-PLA2水平;流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17、Treg细胞的比例;Western Blot检测肾组织中Notch信号通路的Notch1、Jagged1蛋白表达.结果:给药12 w后,与正常对照组比较,模型组小鼠肾组织系膜细胞空泡化,大量肾小管管腔肿胀破裂,基底膜增厚;FBG、HbAIc、TC、LDL、Scr、BUN、NGAL、Lp-PLA2和尿液中mALB、UTP水平及肾组织中Notch1、Jagged1蛋白表达显著升高,Treg比例显著降低,Th17比例显著升高(P<0.05).与模型组比较,厄贝沙坦组和益肾健脾通络方高剂量组肾组织病理损伤明显改善;FBG、HbAIc、TC、LDL、Scr、BUN、NGAL、Lp-PLA2和尿液中mALB、UTP水平及肾组织中Notch1、Jagged1蛋白表达显著降低,Treg比例显著升高,Th17比例显著降低(P<0.05).高剂量益肾健脾通络方的作用与厄贝沙坦相当.结论:益肾健脾通络方可能通过抑制Notch信号通路调节Th17/Treg失衡,减轻DKD小鼠肾损伤.
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