丹参饮通过调节线粒体mPTP开放改善缺氧/复氧心肌细胞损伤的机制研究
Study on Mechanism of Danshenyin Decoction in Improving Hypoxic/Reoxygenated Cardiomyocyte Injury by Regulating Mitochondrial mPTP Opening
摘要目的:探讨丹参饮通过调节线粒体通透性过渡孔(mPTP)开放对H9c2 心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的改善作用.方法:体外培养H9c2 心肌细胞建立H/R损伤模型,以不同浓度丹参饮干预正常及H/R损伤H9c2心肌细胞,用CCK-8法筛选丹参饮的实验浓度.将H9c2 心肌细胞随机分为 5 组:空白对照组、模型组、丹参饮组、丹参饮+ATR(mPTP激动剂)组、丹参饮+CsA(mPTP抑制剂)组.CCK-8 法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;酶标法检测细胞培养液上清中LDH、Caspase-3 水平;Calcein AM荧光探针检测mPTP开放程度;Western Blot检测Bak、Bax、CytC蛋白表达.结果:与模型组比较,丹参饮组细胞活力显著升高,细胞凋亡率、mPTP 开放程度及培养液上清LDH、Caspase-3水平和细胞中Bak、Bax、CytC蛋白表达显著降低(P<0.01).mPTP激动剂ATR可显著减弱丹参饮上述作用(P<0.01),mPTP抑制剂CsA可显著增强丹参饮上述作用(P<0.05 或P<0.01).结论:丹参饮抗心肌缺血-再灌注损伤的保护作用可能通过抑制线粒体mPTP开放进而抑制细胞凋亡来实现.
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