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基于PDK2/PDH-Nrf2轴调控糖酵解和氧化损伤探讨温肺降浊方含药血清对OGD/R损伤HT22细胞的影响及分子机制

Exploring the Effect and Molecular Mechanism of Serum Containing Wenfei Jiangzhuo Decoction on OGD/R-Induced HT22 Cells Based on the Regulation of Glycolysis and Oxidative Damage by the PDK2/PDH-Nrf2 Axis

摘要目的:基于PDK2/PDH-Nrf2 信号轴调控糖酵解和氧化损伤途径,探讨温肺降浊方含药血清对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤HT22 细胞的影响及分子机制.方法:通过OGD/R诱导HT22 细胞复制血管性痴呆模型,设立正常对照组、模型组、DCA(丙酮酸脱氢酶激酶抑制剂)组和温肺降浊方含药血清组.CCK-8 检测 OGD 处理HT22 细胞最佳时间点及不同温肺降浊方含药血清对HT22 细胞的最佳干预浓度和时间点;检测各组细胞内耗氧率和细胞外酸化率;ROS荧光标记各组细胞活性氧表达;免疫荧光双标观察细胞内PDK2、PDH阳性细胞表达;qRT-PCR和Western Blot分别检测各组细胞内PDK2/PDH-Nrf2 信号轴mRNA和蛋白表达.结果:OGD处理HT22 细胞2 h、20%温肺降浊方含药血清干预 24 h为最佳适合条件.与正常对照组比较,模型组细胞最大耗氧率、活性氧水平和PDK2 阳性表达显著升高,最大酸化率和PDH阳性表达显著降低,PDK2 mRNA和蛋白及p-PDK2 蛋白表达显著升高,PDH、Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05).与模型组比较,DCA组和温肺降浊方含药血清组细胞最大耗氧率、活性氧水平和PDK2 阳性表达显著降低,最大酸化率和PDH阳性表达显著升高,PDK2 mRNA和蛋白及p-PDK2 蛋白表达显著降低,PDH、Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05).结论:温肺降浊方含药血清可通过提高细胞有氧糖酵解能力,抑制线粒体氧化磷酸化,减少神经元细胞过度死亡,其机制可能与PDK2/PDH-Nrf2 信号轴的激活有关.

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2025年48卷1期

193-199页

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