摘要目的:探讨六味地黄丸合二至丸含药血清对与中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)共培养条件下三阴性乳腺癌 4T1 细胞上皮间充质转化(EMT)的调控作用,以及对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响.方法:采用C57 小鼠提取中性粒细胞,用佛波醇 12-十四酸酯 13-乙酸酯(PMA)诱导成NETs,并运用Western Blot检测NETs标志物CitH3的表达.69 只SPF级昆明小鼠随机分为六味地黄丸(11.7 g/kg)组、二至丸(36.9 g/kg)组、六味地黄丸合二至丸(35.1 g/kg)组,每组各 23 只,灌胃相应药物 5 d后取血分离血清.实验设空白对照组、模型组、紫杉醇组、六味地黄丸含药血清组、二至丸含药血清组、六味地黄丸合二至丸含药血清组,CCK-8 法检测细胞增殖活力;细胞划痕试验和Transwell侵袭试验分别检测 4T1 细胞的迁移和侵袭;免疫荧光试验检测CitH3、MPO表达;Western Blot检测EMT相关蛋白和HMGB1/TLR4 信号轴相关蛋白表达.结果:成功诱导NETs,建立 NETs-4T1 共培养体系.与空白对照组比较,模型组细胞增殖活力和迁移、侵袭能力显著升高,E-cadherin蛋白表达显著降低,CitH3、MPO荧光强度和N-cadherin、Vimentin、TLR4、HMGB1 蛋白表达显著升高(P<0.01).与模型组比较,各给药组细胞增殖活力和迁移、侵袭能力显著降低,E-cadherin蛋白表达显著升高,CitH3、MPO荧光强度和N-cadherin、Vimentin、TLR4 蛋白表达显著降低(P<0.05 或P<0.01).六味地黄丸合二至丸的作用显著优于单用六味地黄丸或二至丸.结论:六味地黄丸合二至丸以通过抑制NETs,调控HMGB1/TLR4 信号通路抑制 4T1 细胞EMT特征表达,抑制 4T1 细胞的迁移和侵袭.