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补骨脂素对成骨细胞Caspase-3、8、9蛋白和Bcl-2、Bax、Bid蛋白的调控机制研究

Regulatory Mechanism of Psoralen on Caspase-3, 8, 9, Bcl-2, Bax and Bid Protein in Osteoblasts

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摘要目的分析补骨脂素对成骨细胞Caspase-3、8、9蛋白和Bcl-2、Bax、Bid蛋白的调控,探讨细胞凋亡信号途径和骨质疏松症的关系.方法选用1日龄SD大鼠获取原代的成骨细胞体外培养,细胞分成补骨脂素组、雌二醇组和正常组,补骨脂素组的培养基中添加补骨脂素,雌二醇组的培养基中添加雌二醇,正常组常规培养,采用MTT比色法检测补骨脂素的最佳浓度及最佳时间,荧光定量PCR法检测各组Caspase-3、8、9蛋白和Bcl-2、Bax、Bid蛋白的表达.结果在补骨脂素的最佳浓度及最佳时间方面,第8天时成骨细胞的OD值达最大值,而且以5μmol·L-1显著;对于Bax蛋白,与正常组比较,雌二醇组更能显著下调Bax蛋白的表达(P<0.05).对于Bid蛋白,补骨脂素组较雌二醇组更能上调该蛋白的表达量(P<0.05).对于Bcl-2蛋白,补骨脂素组的相对表达量高于雌二醇组和正常组(P<0.05),而且补骨脂素组的Bcl-2/Bax的比值也高于雌二醇组(P<0.05).在Caspase表达方面,相对于正常组,补骨脂素组和雌二醇组均能显著下调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达量(P<0.05),而且补骨脂素组比雌二醇组更能下调Caspase-9蛋白的表达(P<0.05).结论补骨脂素可以上调成骨细胞内Bid蛋白和Bcl-2蛋白的表达,结合补骨脂素对成骨细胞的增殖情况,提示补骨脂素有可能以上调抑制凋亡蛋白为主,而且补骨脂素可能通过线粒体途径进行细胞凋亡的调控.

作者李颖 ^[1] 黄宏兴 ^[2] 白波 ^[3] 姜志强 ^[1] 学术成果认领

作者单位广东省中西医结合医院,广东佛山,528200 ^[1] 广州中医药大学,广东广州,510405 ^[2] 广州医科大学附属第一医院,广东广州,510120 ^[3]

关键词成骨细胞补骨脂素半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶 Bcl-2家族蛋白 Osteoblasts psoralen cysteine aspartate- specific protease family of Bcl-2 protein

分类号 R285.5（中药学）

栏目名称

药效与毒理学研究

DOI 10.19378/j.issn.1003-9783.2017.03.015

发布时间 2017-06-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（81001532）中国博士后科学基金（20100480737）广东省自然科学基金（2014A030313748）广东省科技计划（2013B021800162）广东省科技计划（2010B030700076）广东省中医药局项目（20141040）广州市珠江科技新星（2012J2200037）佛山市科技创新平台建设项目（2013AG100022）