换一批活血消瘢益气方对转化生长因子β1诱导的AML12细胞凋亡的影响及其机制研究
Effect and Mechanism of Huoxue Xiaozheng Yiqi Recipe on TGF-β1-induced Apoptosis of AML12 Cells
摘要目的 研究活血消癥益气方对体外转化生长因子β1 (TGF-β1)诱导的小鼠肝实质细胞AML12凋亡的影响及其可能的机制.方法 利用TGF-β1(5 ng·mL-1)诱导AML12细胞建立凋亡模型(诱导24 h)及氧化应激模型(诱导4h),设置空白对照组、模型对照组、不同剂量活血消瘢益气方(0.1、0.2、0.5 g·L-1)组.采用CCK-8法检测药物对细胞活力的影响,Hoechst 33342法及Annexin V-FITC法检测药物对凋亡的影响,DCFH-DA法检测药物对细胞内活性氧含量的影响,蛋白印迹法检测药物对Bcl-2、Bax、Caspase-3及Nrf2蛋白表达量的影响.结果 与空白对照组比较,凋亡模型对照组细胞活力下降,凋亡细胞占比及出现核固缩细胞比例等明显增加(P＜0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2明显下调,同时Bax及Capase-3等凋亡蛋白明显上调(P＜0.05);且氧化应激模型对照组细胞内活性氧含量明显升高(P＜0.05),细胞内Nrf2表达增加但核转位减少(P＜0.05).与凋亡模型组比较,活血消瘢益气方各剂量组可明显恢复细胞活力,减少凋亡细胞占比及核固缩细胞比例(P＜0.05);同时上调Bcl-2表达,下调Bax及Capase-3的表达(P＜0.05).与氧化应激模型组比较,活血消癥益气方各剂量组可明显减少细胞内活性氧的含量(P＜0.05),增加Nrf2蛋白的表达及促进其核转位(P＜0.05).结论 活血消癥益气方可逆转TGF-β1诱导的肝细胞凋亡,其机制可能与调控线粒体凋亡途径及Nrf2通路功能有关.
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分类号
R285.5
栏目名称
DOI
10.19378/j.issn.1003-9783.2021.09.007
发布时间
2021-11-04
基金项目
广东省高校重点平台及科研项目（2017GKTSCX093）；
广东省建设中医药强省重点科研课题（20183019）
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