红景天含药血清对肿瘤坏死因子α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响
Effect of Serum Containing Herba Rhodiolae on the Proliferation of Human Fibroblast-like Synoviocytes-rheumatoid Arthritis Induced by Tumor Necrosis Factor-α
摘要目的 探讨红景天含药血清对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的影响.方法 制备空白组、模型组、雷公藤多苷组(9.45 mg·kg-1)及红景天低、中、高剂量组(1.05、2.1、4.2 g·kg-1)大鼠含药血清;体外培养HFLS-RA,以20 ng·mL-1 TNF-α及10%不同组含药血清对HFLS-RA进行干预.采用MTT法检测各组含药血清对HFLS-RA细胞的增殖作用;ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素10(IL-10)的含量;PCR法检测细胞中维甲酸受体相关孤儿受体γt(ROR-γt)、信号转导及转录激活因子3(Stat3)、叉头样转录因子3(Foxp3)mRNA表达;Western Blot法检测细胞中ROR-γt、Stat3、Foxp3蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组培养HFLS-RA 24、48 h后细胞增殖水平明显升高(P<0.01),ROR-γt、Stat3 mRNA及蛋白表达上调(P<0.01),IL-6、IL-17水平升高(P<0.01),Foxp3 mRNA 及蛋白表达下调(P<0.01),TGF-β、IL-10水平降低(P<0.01).与模型组比较,红景天各剂量组HFLS-RA细胞增殖水平降低(P<0.01),ROR-γt、Stat3 mRNA及蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01),IL-6、IL-17水平降低(P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达上调(P<0.01),TGF-β、IL-10水平升高(P<0.01).结论 红景天含药血清可抑制TNF-α诱导的HFLS-RA细胞的异常增殖,其机制可能与下调ROR-γt、Stat3表达及上调Foxp3表达有关.
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