银连含漱液对脂多糖诱导人牙龈成纤维细胞的作用
Effect of Yinlian Gargle on Human Gingival Fibroblasts Induced by Lipopolysaccharide
摘要目的 观察银连含漱液对脂多糖(LPS)诱导人牙龈成纤维细胞(HGFs)炎症反应、氧化应激及细胞凋亡的影响.方法 收集临床患者的健康牙龈组织,采用组织块法培养HGFs并采用免疫荧光法进行细胞鉴定.采用CCK-8法检测不同体积分数银连含漱液(2.5%、5%、10%、20%、40%)、不同浓度绿原酸(0.01、0.1、0.5、1、10 mg·mL-1)及LPS(1、10、20、35、50 μg·mL-1)分别与HGFs共培养24、48、72 h后的增殖变化情况.依据CCK-8检测结果,将HGFs分为 4 组:DMEM对照组、1 μ g·mL-1 LPS组、1 μ g·mL-1 LPS+20%银连含漱液组、1 μ g·mL-1 LPS+1 mg·mL-1绿原酸组.干预24h后,采用流式细胞术检测HGFs的凋亡水平;WST-1法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性;ELISA法检测细胞上清液中炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的含量.结果 选择对HGFs无明显毒性作用的1 mg·mL-1绿原酸、20%银连含漱液和1 μg·mL-1 LPS作用24 h.与对照组比较,LPS组的HGFs凋亡率显著升高(P<0.001),SOD活力显著降低(P<0.001),上清液中的IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.001).与LPS组比较,LPS+20%银连含漱液组及LPS+1 mg·mL-1绿原酸组的HGFs凋亡率显著降低(P<0.001),SOD活力显著升高(P<0.01,P<0.001),上清液中的IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.001).与LPS+20%银连含漱液组比较,LPS+1 mg·mL-1绿原酸组的HGFs凋亡率显著降低(P<0.001),SOD活力显著升高(P<0.01),上清液中的IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05,P<0.01).结论 银连含漱液可抑制LPS诱导的HGFs细胞凋亡,提高其抗氧化能力,降低炎症反应,该作用可能与活性成分绿原酸密切相关.
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