摘要目的 探讨青蒿琥酯联合血必净注射液对实验性脑型疟小鼠的保护作用及机制探讨.方法 取 4～5 周龄的雌性C57BL/6 小鼠,随机分为空白对照组(0.9%NaCl)、感染对照组(0.9%NaCl)、血必净注射液组(血必净,8 mL·kg-1,5 d)、青蒿琥酯组(青蒿琥酯,20 mg·kg-1,首剂加倍,5 d)、青蒿琥酯联合血必净注射液组(简称联合用药组;血必净 8 mL·kg-1+青蒿琥酯 20 mg·kg-1,青蒿琥酯首剂加倍,5 d),每组 20 只.按照上述分组腹腔注射给药,每日 1 次.记录小鼠体质量、体温、外周血感染率及生存情况;伊文思蓝染色检测小鼠脑组织血脑屏障通透性;苏木素-伊红(HE)染色检测小鼠脑组织病理变化;ELISA法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)水平;Western Blot法检测小鼠脑组织中紧密连接蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、血管内皮钙黏蛋白(VE-Cadherin)、血管生成素1(Ang-1)、Ang-2、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子 1(VCAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、p-eNOS蛋白水平;免疫荧光法检测小鼠脑组织中ICAM-1 蛋白水平;总一氧化氮(NO)检测试剂盒检测小鼠脑组织中一氧化氮(NO)水平.结果 与空白对照组比,感染对照组小鼠体温、体质量下降(P＜0.01),给药结束时感染率达到 30.99%,生存率为 0,小鼠出现跛行、反射消失等神经症状,小鼠昏迷及行为量表评分(RMCBS)评分下降(P＜0.01),血脑屏障通透性增大(P＜0.05),脑微血管中有受感染红细胞和白细胞黏附,存在出血点,血清中TNF-α、IFN-γ水平上升(P＜0.05,P＜0.01),脑组织中Occludin、ZO-1、VE-Cadherin、Ang-1、p-Akt/Akt蛋白表达下降(P＜0.05,P＜0.01),ICAM-1、VCAM-1 蛋白表达上升(P＜0.05,P＜0.01),NO表达下降(但P＞0.05);与感染对照组比,联合用药组小鼠体温、体质量上升(P＜0.01),给药结束时感染率为 0.67%,抑制率达到 97.84%,生存率为 20%,小鼠神经症状改善,RMCBS评分上升(P＜0.01),血脑屏障通透性减小(但P＞0.05),脑微血管无明显细胞黏附,血清中TNF-α、IFN-γ 水平下降(P＜0.05,P＜0.01),脑组织中 Occludin、ZO-1、VE-Cadherin、Ang-1、VEGF、PI3K、p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS 蛋白表达上升(P＜0.05,P＜0.01),ICAM-1、VCAM-1 蛋白表达下降(P＜0.01),NO表达上升(P＜0.01).结论 青蒿琥酯联合血必净注射液能有效改善脑型疟小鼠的症状体征,减少脑微血管中的黏附,减轻过度炎症反应以及降低血脑屏障的通透性,其作用机制可能与激活VEGF/Akt/eNOS信号途径,提高NO的表达有关.