摘要目的 探讨补阳还五汤合参芪地黄汤化裁是否通过m6A RNA甲基化酶——甲基转移酶蛋白 3(METTL3)调节Snail改善糖尿病肾病(DKD)小鼠肾组织损伤.方法 将 11～12 周龄db/db小鼠 24 只适应性喂养 1 周并监测尿蛋白均阳性后随机分为模型组、中药组、西药组.db/m组小鼠作为正常组,每组 8 只.中药组和西药组分别予补阳还五汤合参芪地黄汤化裁和厄贝沙坦灌胃;正常组及模型组灌胃等体积蒸馏水,每日 1 次,连续 12 周.之后处死小鼠,摘取肾脏,HE、Masson染色观测肾组织病理改变.全自动生化分析仪检测小鼠血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、尿微量白蛋白(mALB)水平;qRT-PCR和Western Blot法检测甲基转移酶蛋白 3(METTL3)、甲基转移酶蛋白 14(METTL14)、肾母细胞瘤 1关联蛋白(WTAP)、ALKB同源物 5(ALKBH5)、脂肪与肥胖相关蛋白(FTO)和Snail的蛋白及mRNA表达;Western Blot法检测小鼠肾组织上皮-间充质转化(EMT)、纤连蛋白(FN)、波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;免疫荧光检测E-cadherin、α-SMA的表达;免疫共定位检测METTL3 与Snail的共表达.同时光镜观察肾脏病理形态学变化.结果 与正常组比较,模型组小鼠肾小球肥大,系膜基质增加,基底膜增厚,囊腔变窄,间质炎性细胞浸润及纤维化(P＜0.05);FBG、TC、TG、BUN、Scr及mALB含量明显升高(P＜0.01);肾组织 METTL3、METTL14 和 WTAP 的蛋白和 mRNA 降低(P＜0.05),Snail mRNA和ALKBH5 的蛋白和mRNA升高(P＜0.05),而FTO的蛋白和mRNA无明显变化(P＞0.05);同时EMT相关蛋白E-cadherin降低(P＜0.05),Vimentin、α-SMA、FN升高(P＜0.05).与模型组比较,经补阳还五汤合参芪地黄汤化裁中药干预后,糖尿病肾病小鼠肾脏病理损伤程度明显改善(P＜0.05);TC、TG、BUN、Scr及mALB明显降低(P＜0.01);肾组织m6A水平恢复(P＜0.05),METTL3 的蛋白和mRNA升高(P＜0.05),Snail mRNA水平降低(P＜0.01),同时抑制了肾组织EMT的发生(P＜0.05);而METTL14、ALKBH5、FTO、WTAP的蛋白和mRNA无明显变化(P＞0.05),对FBG水平也无明显影响(P＞0.05).结论 补阳还五汤合参芪地黄汤化裁可能通过m6A RNA甲基化酶METTL3 调节Snail改善糖尿病肾病小鼠肾脏损伤,降低尿蛋白排泄,改善糖尿病肾病肾间质纤维化的进展.