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桑术益肾降浊方调控内皮祖细胞改善去势高脂血症大鼠颈动脉损伤的作用及机制

Effect and Mechanism of Sangshu Yishen Jiangzhuo Formula in Regulating Endothelial Progenitor Cells to Improve Carotid Artery Injury in Castrated Hyperlipidemic Rats

摘要目的 基于血管内皮祖细胞(EPCs)探讨桑术益肾降浊方(SYJF)对去势高脂血症大鼠颈动脉损伤的作用及机制.方法 将 50 只雌性SD大鼠随机分为 5 组:空白组、假手术组、模型组、中药组、西药组,每组各10 只.采用去势+导丝损伤法+高脂饮食复制去势高脂血症颈动脉损伤大鼠模型.空白组、假手术组、模型组予以等量生理盐水灌胃,中药组予以SYJF冻干粉生理盐水溶液(生药浓度 3.67 g·kg-1)灌胃,西药组予以戊酸雌二醇生理盐水溶液(0.097 mg·kg-1)灌胃,每天 1 次,连续 8 周.采用HE染色法观察大鼠颈动脉内膜组织病理变化,分别测量颈动脉管腔面积(LA)、内弹力板以内面积(IELA)、外弹力板以内面积(EELA),计算血管内膜面积(IA)、中膜面积(MA)、颈动脉的内膜增生程度(DIH)、管腔狭窄程度(DLS);Masson染色法观察大鼠颈动脉血管壁组织病理变化;分离、培养EPCs,并通过细胞吞噬实验鉴定EPCs;免疫荧光法检测EPCs表面标记物CD31、CD34、CD133、VEGFR-2 的表达水平;流式细胞术检测表达CD31、CD34、CD133、VEGFR-2的EPCs细胞比例;通过血管形成实验检测EPCs血管新生能力.结果(1)与假手术组比较,模型组大鼠的血管内膜增厚,血管平滑肌排列紊乱,内膜下有明显的脂质沉积和泡沫细胞聚集;大鼠颈动脉LA水平显著下降(P<0.01),IA、MA、DIH、DLS水平显著升高(P<0.05,P<0.01);颈动脉血管内皮不连续,部分区域内膜脱落,脱落区域胶原纤维增多,凸向管腔,有形成纤维斑块的趋势,平滑肌排列紊乱,胶原容积分数显著上升(P<0.01).与模型组比较,中药组及西药组大鼠的颈动脉血管内膜增厚现象趋于缓解,血管平滑肌排列更整齐,内膜下也未见明显泡沫细胞聚集及脂质沉积;中药组及西药组大鼠颈动脉LA显著升高(P<0.01),MA、DIH、DLS水平显著下降(P<0.01);颈动脉血管内皮更为完整连续,平滑肌排列整齐,胶原容积分数显著降低(P<0.01).(2)鉴定结果显示 5 组细胞均为正在分化的大鼠EPCs.与假手术组比较,模型组大鼠EPCs的CD31、VEGFR-2 表达水平显著降低(P<0.01),CD133 表达水平显著升高(P<0.05);表达 CD31、CD34、VEGFR-2 的细胞比例均显著降低(P<0.01),表达CD133 的细胞比例显著升高(P<0.01);EPCs新生的管腔数目显著减少(P<0.01).与模型组比较,中药组及西药组大鼠EPCs 的CD31、VEGFR-2 表达水平显著升高(P<0.01),中药组EPCs 的CD133 表达水平明显降低(P<0.05);中药组及西药组EPCs中表达CD31、CD34、VEGFR-2 的细胞比例显著升高(P<0.01),表达CD133 的细胞比例显著降低(P<0.01);EPCs新生的管腔数目显著增多(P<0.01).结论 SYJF可能通过促进EPCs增殖、分化及增强血管生成能力,抑制血管修复过程中血管内膜过度增生、血管狭窄、血管胶原纤维变性,促进去势高脂血症大鼠颈动脉损伤修复,从而延缓动脉粥样硬化进程,对绝经后心血管疾病的防治具有参考意义.

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中药新药与临床药理

中药新药与临床药理

2025年36卷6期

869-878页

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