摘要目的 基于"胰脾同源"理论探讨大建中汤通过IL-6/STAT3 通路抑制髓源抑制性细胞(MDSCs)治疗胰腺癌的作用机制.方法 将 74 只C57BL/6J小鼠随机分为模型对照组、吉西他滨组(40 mg·kg-1)及大建中汤低、中、高剂量组(1.84、3.69、7.38 g·kg-1·d-1),每组 10 只;同型对照组、大建中汤同型对照组、MDSCs耗竭组、大建中汤MDSCs耗竭组,每组 6 只.采用原位注射对数生长期Panc02-luc细胞(5×105 个/只)复制小鼠胰腺癌原位模型.造模后次日开始,吉西他滨组腹腔注射给药,每次 40 mg·kg-1,1 周 2 次;大建中汤各剂量组按照上述剂量灌胃给药,每日 1 次,持续给药 4 周.同型对照组给予IgG抗体腹腔注射(10 g·kg-1),隔日注射,注射体积为 0.2 mL;大建中汤同型对照组在同型对照组干预的基础上,给予中剂量大建中汤(3.69 g·kg-1)灌胃,每日 1 次;MDSCs耗竭组给予Gr-1 抗体腹腔注射(10 g·kg-1),隔日注射,注射体积为 0.2 mL;大建中汤MDSCs耗竭组在MDSCs耗竭组干预的基础上,给予中剂量大建中汤(3.69 g·kg-1)灌胃,每日 1 次;各组均持续给药2 周.检测并记录小鼠生存期与体质量;采用小鼠活体成像检测肿瘤生长情况;检测大建中汤含药培养基pH值、渗透压值;采用MTT法测定细胞活力;流式细胞术检测胰腺肿瘤及脾脏组织中MDSCs、CD3+T细胞、树突状细胞(DCs)、巨噬细胞及自然杀伤细胞(NKs)的细胞占比;RT-qPCR法检测肿瘤MDSCs免疫抑制功能相关基因的表达水平;网络药理学分析大建中汤调控 MDSCs治疗胰腺癌的核心靶点;从 GEO 数据库下载GSE217845 数据集,进行人类胰腺癌单细胞分析;Western Blot法检测肿瘤MDSCs中STAT3、Arg-1、S100A9蛋白表达水平.结果 (1)与模型对照组比较,大建中汤低、中剂量组及吉西他滨组原位胰腺癌小鼠的生存期明显延长(P＜0.05,P＜0.01);大建中汤中剂量组小鼠在第 18、25 天的胰腺肿瘤组织荧光强度及肿瘤质量均显著降低(P＜0.01).(2)与空白组(DMEM完全培养基)比较,不同浓度大建中汤对胰腺癌细胞培养基pH值、渗透压及PANC-1、Panc02 胰腺癌细胞活性均无明显的影响(P＞0.05).(3)与模型对照组比较,大建中汤中剂量组小鼠脾脏及肿瘤组织中的MDSCs数量显著降低(P＜0.01),CD3+T细胞显著增加(P＜0.05,P＜0.01),巨噬细胞及NKs细胞数量无明显变化(P＞0.05),肿瘤组织中的DCs细胞数量显著增加(P＜0.01).(4)与同型对照组比较,在第 17 天大建中汤同型对照组小鼠的胰腺肿瘤荧光强度明显降低(P＜0.05),MDSCs细胞数量显著下降(P＜0.01),CD3+T 细胞数量显著增加(P＜0.01).与 MDSCs耗竭组比较,在第 3、17 天大建中汤MDSCs耗竭组小鼠的胰腺肿瘤荧光强度无明显变化(P＞0.05),MDSCs及 CD3+T细胞数量亦无明显变化(P＞0.05).(5)网络药理学分析显示,STAT3、IL-6 是大建中汤调控MDSCs治疗胰腺癌的核心靶点;单细胞分析显示,MDSCs中富集了炎症、TNFα/NF-κB、IL-6/JAK/STAT3 等信号通路,且MDSCs也是富集IL6/JAK/STAT3 通路的主要细胞群体之一.(6)与模型对照组比较,大建中汤中剂量组胰腺癌小鼠肿瘤组织中MDSCs的Arg-1、S100A8、S100A9、IL-6、STAT3 mRNA 表达及 STAT3、Arg-1、S100A9 蛋白表达均显著下调(P＜0.05,P＜0.01),NOS2 mRNA表达无明显变化(P＞0.05).结论 大建中汤可有效延长胰腺癌小鼠生存期,延缓胰腺癌进展,其可能是通过抑制IL-6/STAT3 通路,减少胰腺癌小鼠脾脏及肿瘤组织中的MDSCs浸润,下调其免疫抑制功能而实现的.