摘要目的 基于网络药理学分析及实验验证探讨五苓散治疗尿酸性肾病(UAN)的作用机制.方法 (1)利用TCMSP、Swiss Target Prediction数据库筛选五苓散的活性成分及其作用靶点;利用OMIM、GeneCard、TTD数据库检索UAN疾病相关靶点;对活性成分作用靶点与UAN疾病相关靶点取交集,所得交集靶点即为五苓散治疗UAN的潜在作用靶点.通过STRING数据库构建潜在作用靶点蛋白互作(PPI)网络,筛选出关键靶点;利用Cytoscape 3.6.1 软件构建"中药-活性成分-关键靶点"网络.通过DAVID 分析平台对关键靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析;筛选出核心靶点及其对应的关键活性成分,并进行分子对接验证.(2)采用大鼠灌胃给予氧嗪酸钾(1.5 g·kg-1)+腺嘌呤(0.1 g·kg-1)溶液,每日 1 次,连续 28 d,复制UAN大鼠模型.将SD大鼠随机分为正常组、模型组、别嘌醇组(0.03 g·kg-1)和五苓散低、中、高剂量组(2.88、5.76、11.52 g·kg-1),每组10 只,灌胃给药(10 mL·kg-1),每天 1 次,连续 28 d.采用ELISA 法检测大鼠血尿酸(SUA)、血肌酐(SCR)、血尿素氮(BUN)及尿尿酸(UUA)、尿肌酐(UCR)、尿尿素氮(UUN)的水平;HE 染色法观察大鼠肾脏组织病理变化;免疫组化法检测大鼠肾脏组织中MMP2、P-IGF1R、P-SRC、P-PIK3CA、P-ER α蛋白表达水平.结果 (1)共得到五苓散治疗UAN的潜在作用靶点 124 个,关键靶点 46 个.关键靶点的生物过程涉及对MAPK级联正调控、肽基酪氨酸磷酸化、磷脂酰肌醇 3-激酶信号传导正调控等;KEGG通路主要涉及癌症发病途径、内分泌抵抗、AGE-RAGE信号通路在糖尿病并发症中的作用等.内分泌抵抗途径是五苓散治疗UAN的关键通路,涉及 5 个核心靶点包括MMP2、IGF1R、SRC、PIK3CA、ESR1;7 个关键活性成分包括泽泻醇B、泽泻醇B乙酸酯、16α-羟基松苓新酸、去氢土莫酸、猪苓酸C、啤酒甾醇、(22E,24R)-麦角甾-6-烯-3β,5α,6β-三醇.7 个关键活性成分与 5 个核心靶点均有较强的结合力.(2)与正常组比较,模型组大鼠的SUA、SCR、BUN水平均明显升高(P＜0.05),UUA、UCR、UUN水平均明显降低(P＜0.05),肾脏系数明显升高(P＜0.05);肾小球局部硬化、萎缩,肾小管出现不规则扩张或萎缩,部分肾小管有明显炎性细胞浸润;肾脏组织中MMP2、P-IGF1R、P-SRC、P-PIK3CA、P-ERα蛋白表达水平均明显升高(P＜0.05).与模型组比较,各给药组大鼠的SUA、SCR、BUN水平均明显降低(P＜0.05),UUA、UUN水平均明显升高(P＜0.05);别嘌醇组和五苓散中、高剂量组大鼠的UCR水平明显升高(P＜0.05;别嘌醇组及五苓散低、高剂量组大鼠的肾脏系数明显降低(P＜0.05);各给药组大鼠的肾小球、肾小管病变均有不同程度改善;肾脏组织中MMP2、P-IGF1R、P-SRC、P-PIK3CA、P-ERα蛋白表达水平均明显降低(P＜0.05).结论 五苓散能够降低UAN大鼠的SUA、SCR、BUN水平,改善其肾脏组织病理损伤,内分泌抵抗途径可能是五苓散治疗UAN的关键通路,涉及MMP2、IGF1R、SRC、PIK3CA、ESR1 等核心靶点.