摘要目的 探讨脑通合剂含药血清对脂多糖诱导的人小胶质细胞(HMC3)介导的神经元炎症反应的影响,及脑通合剂治疗血管性痴呆(VD)潜在的作用机制.方法 制备脑通合剂含药血清,利用CCK-8 法筛选脂多糖的最佳诱导浓度及含药血清的最佳干预浓度.脂多糖刺激HMC3 细胞,收集其上清液并与人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)共培养,建立血管性痴呆体外炎症模型.将HMC3 和SH-SY5Y细胞随机分为 6 组:正常组、模型组、空白血清组、含药血清组、空白血清+抑制剂TAK-242 组及含药血清+抑制剂TAK-242 组.各组HMC3细胞经相应处理后,将HMC3 细胞上清液加入对应组别的SH-SY5Y细胞中.ELISA法检测脑通合剂含药血清对脂多糖诱导的HMC3 细胞介导的SH-SY5Y细胞上清液中IL-1β、IL-6 和TNF-α的表达;Western Blot法检测SH-SY5Y细胞内Toll样受体 4(TLR4)、丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)和核因子κB(NF-κB)的蛋白表达水平;CCK-8 法检测含药血清对脂多糖诱导的HMC3 细胞介导的SH-SY5Y细胞活力的影响.结果 脂多糖诱导HMC3 细胞的最佳浓度为 1.0 μg·mL-1(P＜0.01).空白血清和含药血清对HMC3 细胞的最佳干预浓度均为 10%(P＜0.05,P＜0.01).ELISA结果显示,与SH-SY5Y细胞正常组比较,模型组IL-1β、IL-6、TNF-α含量增加(P＜0.01);与模型组比较,空白血清组与含药血清组炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量降低(P＜0.01),且含药血清组IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著低于空白血清组(P＜0.01).同时,空白血清+TAK-242 组和含药血清+TAK-242 组的IL-1β、IL-6、TNF-α含量分别低于空白血清组和含药血清组(P＜0.01).Western Blot结果表明,与正常组比较,模型组TLR4 表达升高(P＜0.01),p-p38MAPK/p38MAPK和p-p65NF-κB/p65NF-κB比值升高(P＜0.01);与模型组比较,空白血清组和含药血清组TLR4 表达降低、p-p38MAPK/p38MAPK和p-p65NF-κB/p65NF-κB比值降低(P＜0.01),且含药血清组表达低于空白血清组(P＜0.01),同时空白血清组和含药血清组的p-p65NF-κB/p65NF-κB分别高于空白血清+TAK-242 组和含药血清+TAK-242 组(P＜0.01).CCK-8 结果表明,脂多糖可以显著降低HMC3 细胞介导的SH-SY5Y细胞存活率(P＜0.01),而含药血清能够提高其细胞存活率(P＜0.01),且加入TAK-242 可进一步增强细胞存活率(P＜0.01).结论 脑通合剂含药血清可抑制TLR4/p38MAPK/NF-κB信号通路,减轻小胶质细胞介导的神经元炎症反应,从而发挥对血管性痴呆的神经保护作用.