摘要目的 基于琥珀酸脱氢酶(SDH)探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤(IR)大鼠氧化应激损伤的作用及机制.方法 (1)采用人工文本挖掘方法筛选补阳还五汤的活性成分;利用CB-Dock2 蛋白配体分子对接网站进行活性成分与SDH靶点对接,考察二者的相互作用.(2)将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、DMM组、补阳还五汤组、补阳还五汤+DMM组.使用LONGA线栓法复制大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型.DMM组于MCAO术前 15 min给予 6 mg·kg-1 丙二酸二甲酯(DMM,SDH抑制剂)腹腔注射;补阳还五汤组在术后给予补阳还五汤 16 g·kg-1 灌胃,给药 2 次;补阳还五汤+DMM组于术前 15 min给予 6 mg·kg-1 DMM腹腔注射,术后给予补阳还五汤 16 g·kg-1 灌胃(给药 2 次).脑缺血再灌注 24 h后,通过Zea Longa评分进行大鼠神经功能缺损状况评价;通过横木行走测试来评估大鼠平衡协调能力;通过抓力测试来评估大鼠肢体力量;采用TTC染色法检测脑梗死体积;通过脑组织含水量测定观察大鼠脑水肿情况;HE染色法观察大鼠脑组织病理变化;Western Blot法检测缺血侧脑组织SDH蛋白表达水平;免疫荧光法检测缺血侧边缘脑组织SDH表达水平;ELISA法检测血清SDH含量;检测缺血侧脑组织中SDH活性及活性氧(ROS)含量.结果 (1)筛选出的 16 个活性成分均与SDH具有一定亲和力(结合能均＜-5 kcal·mol-1),以大黄酚结合能力最好(结合能为-10.2 kcal·mol-1),欧当归内酯A次之(结合能为-10.1 kcal·mol-1).(2)与假手术组比较,模型组大鼠神经行为学评分及横木行走测试评分均显著升高(P＜0.01),抓力测试数值显著降低(P＜0.01);脑梗死体积百分比显著增加(P＜0.01),脑含水量显著升高(P＜0.01);脑组织缺血侧皮质区部分呈疏松的网状结构,神经细胞排列紊乱、完整性被破坏甚至萎缩、数量减少,核固缩、碎裂;缺血侧脑组织SDH蛋白表达显著上调(P＜0.01),SDH阳性表达水平显著升高(P＜0.01),SDH活性显著升高(P＜0.01),ROS含量显著升高(P＜0.01);血清SDH含量显著增加(P＜0.01).与模型组比较,各给药组大鼠的抓力测试数值显著升高(P＜0.05,P＜0.01),补阳还五汤组大鼠的神经行为学评分及横木行走测试评分均明显降低(P＜0.05);各给药组大鼠的脑梗死体积百分比显著降低(P＜0.01),脑含水量均显著降低(P＜0.01),脑组织病理损伤均明显减轻,神经细胞萎缩形态有所改善、数量增多;各给药组大鼠缺血侧脑组织SDH蛋白表达均显著下调(P＜0.05,P＜0.01),SDH阳性表达水平显著降低(P＜0.01),SDH活性显著降低(P＜0.01),ROS含量显著降低(P＜0.01);各给药组大鼠血清SDH含量显著降低(P＜0.05,P＜0.01).与DMM组比较,补阳还五汤组大鼠的抓力测试数值明显升高(P＜0.05);脑梗死体积百分比显著降低(P＜0.01);脑组织神经细胞萎缩形态改善及数量增多情况更好;缺血侧脑组织ROS含量显著降低(P＜0.01).与补阳还五汤组比较,补阳还五汤+DMM组大鼠的神经行为学评分、横木行走测试评分、抓力测试数值、脑梗死体积百分比、脑含水量、脑组织的病理变化、缺血侧脑组织ROS含量均无明显变化(P＞0.05).结论 补阳还五汤能够改善IR大鼠脑组织缺血区的病理损伤,降低脑水肿程度,具有脑保护作用,可能与其抑制SDH的活性及表达,从而减轻ROS大量产生导致的氧化应激损伤有关.