摘要目的 基于网络药理学及胆汁酸代谢组学探讨气滞胃痛颗粒治疗抑郁症的作用机制.方法 将雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组(5.0 mg·kg-1)及气滞胃痛颗粒低、中、高剂量组(0.512、1.024、2.048 g·kg-1),每组 10 只.采用慢性不可预知温和应激(CUMS)复制抑郁症大鼠模型.造模 5 周后,大鼠灌胃给药,每日 1 次,持续 4 周,给药期间保持CUMS造模.采用行为学检测大鼠抑郁样表现,包括糖水偏好实验、旷场实验、高架十字迷宫实验、强迫游泳实验,计算糖水偏好率、旷场实验总路程、开臂进入时间比、开臂进入次数比及强迫游泳不动时间;HE染色法观察肝脏组织病理变化;检测肝脏及血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平;通过网络药理学方法预测气滞胃痛颗粒治疗抑郁症的潜在作用靶点,构建"中药-活性成分-靶点"网络及潜在作用靶点蛋白互作(PPI)网络,筛选出关键活性成分及核心靶点;对气滞胃痛颗粒治疗抑郁症的潜在作用靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析;基于高效液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)建立靶向胆汁酸代谢组学分析方法,对大鼠肝脏、血清、脑皮质组织的胆汁酸谱(24 种胆汁酸)进行绝对定量分析;qRT-PCR法测定肝脏组织中胆汁酸合成、吸收、转运相关基因的表达水平.结果 (1)与正常组比较,模型组大鼠的糖水偏好率、旷场实验总路程、开臂进入次数比、开臂进入时间比均显著降低或缩短(P＜0.01),强迫游泳不动时间显著延长(P＜0.01);肝脏组织中有少量炎症细胞浸润,血清ALT、AST水平无明显变化(P＞0.05),肝脏组织ALT、AST显著升高(P＜0.01).与模型组比较,气滞胃痛颗粒各剂量组大鼠的强迫游泳不动时间显著缩短(P＜0.01),开臂进入时间比显著升高(P＜0.05,P＜0.01),气滞胃痛颗粒中、高剂量组大鼠的糖水偏好率、开臂进入次数比显著升高(P＜0.05,P＜0.01),气滞胃痛颗粒低、高剂量组大鼠的旷场实验总路程明显延长(P＜0.05);气滞胃痛颗粒中剂量组大鼠的肝脏组织炎症细胞浸润减少,肝脏组织ALT、AST水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01).(2)共获得气滞胃痛颗粒治疗抑郁症的潜在作用靶点 102 个;关键活性成分包括山柰酚、槲皮素、异鼠李素、木犀草素、金圣草黄素、延胡索乙素等;筛选出 50 个核心靶点,包括TNF、AKT1、PPARG、NR1H4 等;潜在作用靶点主要参与调控神经配体受体相互作用、胆汁酸代谢通路、化学致癌受体激活等信号通路.(3)与正常组比较,模型组大鼠肝脏中CA、α-MCA、β-MCA、ω-MCA、HCA、T-CA水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01),DCA、T-αMCA、G-CA、G-CDCA、G-DCA水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01);血清中CA、α-MCA、β-MCA、ω-MCA、HCA、UDCA水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01),T-CA、T-HDCA、G-CA、G-DCA、G-UDCA、G-LCA显著升高(P＜0.05,P＜0.01);脑皮质中DCA水平明显升高(P＜0.05),而CDCA、UDCA水平无明显变化(P＞0.05).与模型组比较,气滞胃痛颗粒中剂量组大鼠肝脏中α-MCA、ω-MCA水平显著升高(P＜0.01),MCA、DCA、T-αMCA、T-HDCA水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01);血清中CA、α-MCA、β-MCA、HCA、T-CDCA水平明显升高(P＜0.05),而T-CA、G-CA、G-DCA、G-UDCA水平明显降低(P＜0.05);气滞胃痛颗粒中剂量组大鼠脑皮质中DCA水平有降低趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).(4)与正常组比较,模型组大鼠肝脏组织中FXR、CYP7B1、CYP8B1 mRNA表达水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01),而BSEP、MRP3、CYP27A1 mRNA表达水平显著降低(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,气滞胃痛颗粒中、高剂量组大鼠肝脏组织中FXR mRMA表达水平显著降低(P＜0.01),BSEP表达水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01);气滞胃痛颗粒低剂量组大鼠肝脏组织中CYP8B1 mRNA表达水平明显降低(P＜0.05),气滞胃痛颗粒中剂量组大鼠肝脏组织中CYP7B1 mRNA表达水平明显降低(P＜0.05),气滞胃痛颗粒高剂量组大鼠肝脏组织中MRP3 mRNA表达水平显著升高(P＜0.01).结论 气滞胃痛颗粒可能通过法尼醇X受体(FXR)调控CUMS诱导抑郁症大鼠的肝-血-脑胆汁酸稳态,发挥抗抑郁及保肝作用.