首页 > 中药新药与临床药理 > 肺康颗粒基于TLR-Hippo/MST信号轴调控慢性阻塞性肺疾病大鼠肺泡巨噬细胞骨架的相关机制

肺康颗粒基于TLR-Hippo/MST信号轴调控慢性阻塞性肺疾病大鼠肺泡巨噬细胞骨架的相关机制

The Mechanism of Feikang Granules in Regulating the Cytoskeleton of Alveolar Macrophages in Chronic Obstructive Pulmonary Disease Rats via the TLR-Hippo/MST Signaling Axis

二维码有效期 120s

摘要目的探讨肺康颗粒基于TLR-Hippo/MST信号轴调控慢性阻塞性肺疾病(COPD,慢阻肺)大鼠肺泡巨噬细胞骨架的相关机制.方法 (1)细胞实验:制备慢阻肺大鼠稳定期动物模型,分离大鼠的肺泡巨噬细胞(AM),分为对照组、慢阻肺组、对照MST抑制剂(XMU-MP-1)组及慢阻肺MST抑制剂组并进行干预.利用Western Blot法检测各组肺泡巨噬细胞中Toll样受体 4(TLR4)、哺乳动物STE20 样蛋白激酶(MST)1/2、Rac1、p-Rac1 蛋白表达,RT-qPCR法检测各组肺泡巨噬细胞中TLR4、MST1/2、Rac1 mRNA的变化,荧光显微镜下观察细胞骨架结构变化;(2)动物实验:制备慢阻肺大鼠稳定期动物模型,分为对照组、慢阻肺组、MST抑制剂组、地塞米松组及肺康颗粒低、中、高剂量组并进行干预,利用Western Blot法检测各组肺泡巨噬细胞中TLR4、MST1/2、Rac1、p-Rac1 蛋白表达,RT-qPCR法检测各组肺泡巨噬细胞中TLR4、MST1/2、Rac1 mRNA的变化,荧光显微镜下观察肺康颗粒干预后细胞骨架结构变化,免疫组织化学技术观察各组肺组织TLR4、MST1/2、p-Rac1 蛋白表达的变化,显微镜下观察苏木素伊红染色肺组织病理切片.结果 (1)细胞实验:与对照组比较,慢阻肺组和对照MST抑制剂组p-Rac1 蛋白表达明显升高(P＜0.05,P＜0.01),TLR4、MST1/2、Rac1 蛋白表达明显下降(P＜0.05,P＜0.01),TLR4、MST1/2、Rac1 mRNA表达水平下降(P＜0.05),肺泡巨噬细胞形态不完整.(2)动物实验:与对照组比较,慢阻肺组和MST抑制剂组p-Rac1 蛋白表达明显升高(P＜0.01),TLR4、MST1/2、Rac1 蛋白表达明显下降(P＜0.01),TLR4、MST1/2、Rac1 mRNA表达水平下降(P＜0.05),肺泡巨噬细胞形态不完整;与慢阻肺组比较,肺康颗粒低、中、高剂量组TLR4、MST1/2、Rac1 蛋白表达明显升高(P＜0.05,P＜0.01),TLR4、MST1/2、Rac1 mRNA表达升高(P＜0.05),肺泡巨噬细胞形态有所恢复.与对照组大鼠比较,慢阻肺组以及MST抑制剂组大鼠肺脏组织中TLR4、MST1/2 蛋白的表达量下降(P＜0.05),p-Rac1 蛋白表达量升高(P＜0.01),大鼠肺泡壁变薄,肺泡结构破坏;与慢阻肺组比较,肺康颗粒低、中、高剂量组大鼠肺脏组织p-Rac1 蛋白表达明显下降(P＜0.05,P＜0.01),同时TLR4、MST1/2 蛋白表达明显上升(P＜0.05),肺组织肺泡结构有不同程度恢复.结论慢阻肺大鼠TLR4、MST1/2、Rac1 呈低表达状态,TLR-Hippo/MST信号轴被抑制,同时肺泡巨噬细胞存在骨架结构异常.肺康颗粒可通过调控TLR-Hippo/MST信号轴改善慢阻肺肺泡巨噬细胞骨架结构.