摘要目的 观察健脾益肠散对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的树突状细胞(DCs)自噬相关蛋白及基因表达的影响.方法 将树突状细胞分为正常组(树突状细胞专用培养液)、模型组(TNF-α)、阴性对照组(TNF-α+空白血清)、阳性药组(TNF-α+柳氮磺吡啶血清)、受试药组(TNF-α+健脾益肠散血清)、抑制剂组[TNF-α+3-甲基腺嘌呤(3-MA)5 mmoL·L-1]、激活剂组[TNF-α+雷帕霉素(RAPA)1 μmoL·L-1]、抑制剂+受试药组[TNF-α+3-MA 5 mmoL·L-1+健脾益肠散血清]、激活剂+受试药组[TNF-α+RAPA 1 μmoL·L-1+健脾益肠散血清].正常组细胞用专用培养液处理 24 h;其他组用 10 ng·mL-1 TNF-α诱导构建炎症模型后,含药血清组均加入 10%含药血清处理 24 h,抑制剂组和激活剂组分别给予 3-MA、RAPA处理 24 h.用细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖能力,免疫荧光检测自噬相关分子肌球蛋白样BCL2 结合蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)阳性表达,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测树突状细胞 Beclin-1、LC3-Ⅱ、泛素结合蛋白 62(p62/SQSTM1)、自噬蛋白 5(Atg5)、自噬蛋白 7(Atg7)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Rt-PCR)法检测p62/SQSTM1、Atg5、Atg7 mRNA表达.结果 与正常组比较,模型组细胞增殖能力明显下降(P＜0.01),模型组细胞Beclin-1、LC3-Ⅱ、Atg5、Atg7 蛋白及Atg5、Atg7 mRNA表达明显降低(P＜0.01),p62/SQSTM1 蛋白及基因表达明显升高(P＜0.01).与模型组比较,受试药组明显增强了细胞增殖能力(P＜0.01),并明显上调了Beclin-1、LC3-Ⅱ、Atg5、Atg7 指标的表达(P＜0.01),下调了p62/SQSTM1 的表达(P＜0.01);抑制剂+受试药组逆转了 3-MA干预下上述指标的异常表达(P＜0.01);激活剂+受试药组与RAPA发挥协同作用,进一步上调了上述指标的表达(P＜0.01).结论 健脾益肠散对TNF-α诱导的树突状细胞自噬相关蛋白及基因表达具有增强作用,可以促进自噬,这可能是其调控肠道免疫耐受、缓解溃疡性结肠炎炎症的机制之一.