白头翁皂苷B4在HEK293细胞中的跨膜转运研究

Transmembrane Transport of Anemoside B4 in HEK293 Cells

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摘要目的:观察白头翁皂苷B4(anemoside B4,以下简称B4)在HEK293 细胞中的跨膜转运,探索其转运机制.方法:细胞计数试剂盒(CCK)-8 法检测细胞活力,得出B4 的安全给药浓度;采用超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS/MS)系统建立B4 含量的质谱检测方法;UPLC-MS/MS检测不同给药浓度和处理时间的B4 在细胞内的含量,观察B4 的转运摄取;采用有机阴离子转运体(OATs)抑制剂和有机阳离子转运体(OCTs)抑制剂与 B4 共同处理细胞,检测胞内的 B4 含量变化,观察其对 B4 的细胞跨膜转运的影响;利用 P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)抑制剂和P-gp小干扰RNA(siRNA)转染技术,考察P-gp是否参与B4 的外排转运.结果:B4 质量浓度<156 μg·mL-1 时给药 48 h内没有细胞毒性;细胞内的B4 含量在给药 1 h时达高峰,且随质量浓度依赖性增加;OCTs抑制剂西咪替丁明显抑制B4 转运进入细胞;抑制P-gp对胞内B4 含量没有明显影响.结论:B4 通过被动转运进入HEK293 细胞,OCTs参与B4 的转运过程,B4 外排不依赖于P-gp.

作者龚琴 ^[1] 何鹿玲 ^[2] 王木兰 ^[1] 冯育林 ^[1] 杜力军 ^[3] 李俊 ^[1] 韩博 ^[4] 学术成果认领

作者单位江西中医药大学,江西南昌 330006;中药固体制剂制造技术国家工程研究中心,江西南昌 330006 ^[1] 江西中医药大学,江西南昌 330006 ^[2] 中药固体制剂制造技术国家工程研究中心,江西南昌 330006;清华大学生命科学学院,北京 100084 ^[3] 中国中医科学院广安门医院,北京 100084 ^[4]

关键词白头翁皂苷B4 HEK293细胞有机阴离子转运体有机阳离子转运体 P-糖蛋白 anemoside B4 HEK293 cells organic anion transporters(OATs)organic cation transporters(OCTs)P-glycoprotein(P-gp)

分类号 R285

栏目名称

基础研究

DOI 10.13313/j.issn.1673-4890.20240701003

发布时间 2025-01-11

基金项目

江西中医药大学博士科研启动基金项目（2023BSZR009）；江西省教育厅科学技术研究项目（GJJ211242）