换一批广西莪术萜类合酶基因CkTPS及其启动子克隆与表达分析
Cloning and Expression Analysis of Terpene Synthase CkTPS Gene and Promoter from Curcuma kwangsiensis
摘要目的:克隆广西莪术Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang萜类合酶(TPS)同源基因及其启动子序列并分析其表达特征.方法:通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别克隆广西莪术TPS基因CkTPS和启动子序列,并利用多种生物信息学工具对其理化性质、蛋白质结构及其保守结构域、启动子顺式作用元件进行分析预测.利用实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)分析广西莪术不同发育时期和外源茉莉酸甲酯(MeJA)处理下的CkTPS基因的组织表达模式.结果:CkTPS基因开放阅读框为1 650 bp,编码549个氨基酸,蛋白质大小为63.72 kDa,蛋白质理论等电点为 5.25,脂肪系数为 94.46,属于不稳定、无跨膜区域和亲水性蛋白.CkTPS蛋白质含有TPS保守结构序列DDXD和NSE/DTE,与姜科植物温郁金、莪术、生姜及红球姜的TPS同源性达到 99%,并聚类为一支.启动子克隆得到启动子长度为 1 807 bp,含有TATA-box、CAAT-box、CGTCA-motif、G-box等元件.CkTPS在广西莪术不同发育时期的组织部位相对表达量存在显著差异,其在块根和根茎中表达量显著高于叶和叶柄;MeJA处理后CkTPS在不同组织中的表达量均显著上调.结论:CkTPS基因参与广西莪术萜类化合物的生物合成调控过程,且该过程可能受MeJA诱导.
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关键词
广西莪术萜类合酶生物信息学分析启动子元件分析表达分析Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liangterpene synthasebioinformatics analysispromoter element analysisexpression analysis
分类号
R282.12（中药学）
栏目名称
DOI
10.13313/j.issn.1673-4890.20250314009
发布时间
2025-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广西自然科学基金项目（2022GXNSFBA035631）
广西自然科学基金项目（2024GXNSFAA010196）
广西药用植物园科研基金项目（GYJ202104）
广西青年岐黄学者培养项目（GXQH202411）
中央本级重大增减支项目（2060302）
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