基于响应面法的燕窝抗氧化肽的酶解工艺优化
Optimization of Enzymatic Hydrolysis Process for Antioxidant Peptides from Edible Bird's Nest Based on Response Surface Methodology
摘要目的:筛选提取燕窝抗氧化肽的最适酶,并通过响应面法优化燕窝抗氧化肽的酶解工艺.方法:采用6 个蛋白酶(碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶)酶解燕窝,以酶解产物的水解度、2,2-联氮-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除率为评价指标,筛选最适酶.以ABTS自由基清除率为评价指标,通过单因素试验和响应面优化试验确定燕窝抗氧化肽的最佳酶解工艺.基于最佳酶解工艺制备燕窝抗氧化肽,通过测定其ABTS自由基清除率、Fe2+螯合率、1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基清除率和相对分子质量分布,分析其抗氧化活性,以及最适酶对燕窝酶解效果.结果:制备燕窝抗氧化肽的最适酶为碱性蛋白酶;最佳酶解工艺为底物质量分数 3%、加酶量 5%、酶解时间 4 h、酶解温度 60℃、酶解pH 10.0.在该条件下,燕窝抗氧化肽的ABTS自由基清除率、Fe2+螯合率的半数抑制浓度(IC50)分别为1.019、2.158 mg·mL-1,2 mg·mL-1 燕窝抗氧化肽的DPPH自由基清除率为 37.44%±0.87%,相对分子质量<3 000 Da的成分占比为 95.82%.结论:确定了燕窝抗氧化肽制备的最适酶和最佳酶解工艺,为燕窝深加工产业的发展提供了参考.
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