Bscl2基因敲除对细胞增殖和DNA损伤修复能力的影响
Effects of Bscl2 gene knockout on cell proliferation and DNA damage repair capacity
摘要目的 探讨Bscl2 基因敲除对细胞增殖和DNA损伤修复能力的影响.方法 构建Bscl2 基因敲除小鼠模型,胰酶消化法分离胚胎发育 14.5 d(E14.5 d)的MEF细胞;免疫荧光染色法对分离培养的MEF细胞进行纯化鉴定;PCR扩增技术结合琼脂糖凝胶电泳对培养细胞及小鼠基因型进行鉴定,并将细胞及小鼠分为野生组(WT wild type)及Bscl2 基因敲除组(KO knockout);使用台盼蓝染色法和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)免疫荧光标记法检测两组细胞增殖能力;用γH2AX免疫荧光染色法评估两组细胞及小鼠组织在双链断裂损伤诱导后的DNA损伤修复能力.结果 分离E14.5 d MEF细胞,成功构建小鼠MEF细胞系.Bscl2 基因敲除MEF细胞的增殖能力明显低于野生型,Bscl2 基因敲除MEF细胞及小鼠活体组织的DNA损伤修复能力较野生型明显减弱.结论 敲除Bscl2 基因抑制小鼠MEF细胞的增殖,降低小鼠细胞及组织的DNA损伤修复能力.
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