口服三叶苷在脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织不同分区的空间分布
Spatial distribution difference and content determination of trilobatin in brain tissue of cerebral ischemia/reperfusion rats
摘要目的 建立一种快速、便捷的高效液相色谱-质谱联用测定方法,用于检测三叶苷(TLB)在脑缺血再灌注损伤(CI-RI)大鼠不同脑组织区域(皮质、海马、间脑、小脑)的含量及空间分布差异,并进行方法学考察.方法 采用Kinetex C18柱(150 mm×2.1 mm,2.6 μm),流动相A:0.1%甲酸水溶液,流动相B:0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱:0~4 min,70%~10%A,4~5 min,10%A~70%A,5~6 min,70%A,设定流速为0.2 mL/min,进样体积为1μL,色谱柱温度条件为30℃.应用电喷雾离子化源(ESI),多反应监测模式(MRM)进行扫描,负离子模式下检测,检测离子对:TLBm/z 435.0、273.1,岩白菜素(内标)m/z 327.0、192.0.结果 方法学结果显示TLB在2~200 ng/mL(r=0.998 8)呈现良好的线性关系,在CIRI大鼠脑组织样本中,精密度、准确度、稳定性、基质效应、回收率等指标符合方法学要求.TLB给药后大鼠海马、小脑、间脑均未检测到TLB,皮质区域TLB含量为(4.33±2.30)ng/mL.结论 该方法操作简单、快速灵敏.可用于TLB治疗CIRI大鼠脑组织不同区域中TLB空间分布差异分析.为贵州省民族药甜茶活性成分TLB在治疗CIRI大鼠方面提供科学依据.
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