换一批二参颗粒对氯化钴诱导的H9C2细胞氧化应激介导的细胞凋亡的保护作用
Protective Effect of Ershen Granules on CoCl2-Induced Apoptosis by Suppressing Oxidative Stress in H9C2 Cells
摘要目的:通过观察二参颗粒对氯化钴(CoCl2)诱导的缺氧损伤和大鼠心肌细胞H9C2凋亡的影响,阐明二参颗粒对心脏的保护作用.方法:以500 μmol/L的CoCl2与H9C2细胞共同作用24 h,建立心肌细胞缺氧缺血模型.将H9C2细胞分为空白对照组、模型对照组、二参颗粒50 μg/mL、100 μg/mL、200 μg/mL组.酶联免疫法检测胞外培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,流式细胞术检测胞内活性氧(ROS)含量、线粒体膜电位(MMP)和凋亡水平,蛋白质印迹分析法检测细胞内Bcl-2/Bax、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9和Cleaved PARP的表达水平.结果:与空白对照组比较,模型对照组细胞活力下降、活性氧(ROS)荧光表达值升高、线粒体膜电位JC-1单体阳性细胞显著升高以及细胞培养液中LDH含量升高,凋亡率显著升高,凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9和Cleaved PARP的蛋白表达上调,Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.05或P＜0.01);与模型对照组比较,二参颗粒能有效改善细胞活力,降低LDH的含量,显著降低胞内ROS荧光表达值,改善线粒体膜电位和凋亡水平,下调凋亡相关蛋白CleavedCaspase-3、Cleaved Caspase-9和Cleaved PARP的蛋白表达,升高Bcl-2/Bax的比值(P＜0.05或P＜0.01).结论:二参颗粒可以抑制CoCl2诱导的心肌细胞ROS水平,减少氧化应激发生,进而改善氧化应激介导的心肌细胞的细胞凋亡.
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