摘要目的:基于转录组学探究呼吸道合胞病毒(RSV)干预后的外泌体在哮喘发病中的作用及潜在中医药干预机制.方法:利用呼吸道合胞病毒(RSV)干预骨髓间充质干细胞后提取外泌体,并进行透射电镜、粒径(NTA)及蛋白免疫印迹法(Western blot)鉴定外泌体的形态及标志物等;将24只SPF级雄性C57小鼠随机分为正常对照组、呼吸道合胞病毒组、外泌体组,造模3周后进行肺功能、病理染色验证是否存在哮喘病理改变,并对小鼠气道组织进行RNA-seq高通量转录组测序,明确差异基因;通过中药整合药理学方法对关键靶点潜在中药进行预测并汇总.结果:透射电镜显示外泌体呈典型的双层膜茶托样结构,粒径显示其平均直径为133.1nm;WB法检测到外泌体膜标志蛋白(CD63、CD9和TSG101)的表达.与正常对照组相比,呼吸道合胞病毒组与外泌体组用力肺活量(FVC)明显下降(P＜0.05),动态肺顺应性(CDYN)明显下降(P＜0.01),呼吸道合胞病毒组、外泌体组最大呼气流量(PEF)明显下降(P＜0.05);而呼吸道合胞病毒组和外泌体组肺阻力(RL)明显升高(P＜0.01).在炎症浸润及气道黏液分泌等方面,外泌体组小鼠有炎症细胞浸润及嗜酸性粒细胞浸润,呼吸道合胞病毒组以中性粒细胞、淋巴细胞浸润为主,杯状细胞黏液分泌较外泌体组明显.气道上皮测序结果提示三组间差异基因多富集在免疫、神经及内分泌系统;差异基因共同富集的通路为过氧化物酶体增殖物激活受体、白介素-17、细胞外基质-受体相互作用信号通路.预测的潜在治疗中药以清热药、补虚药及理气活血药为主,其组分能作用多个靶点及通路调节哮喘神经、内分泌及免疫平衡.结论:病毒干预后的外泌体能够诱导哮喘气道炎症、气道重塑等病理改变;中医药从多环节、多靶点、多系统方面发挥了其整体调节作用.