换一批温胆汤含药血清对谷氨酸诱导HT22细胞NMDAR介导信号分子表达及凋亡的影响
Effect of Wendantang(温胆汤)-Containing Serum on NMDAR-Mediated Signaling Molecule Expression and Apoptosis of HT22 Cells Exposed to Glutamate
摘要目的:探讨温胆汤含药血清对谷氨酸环境下HT22 细胞凋亡及miRNA-219、N-甲基-D-天冬氨酸受体 2B(NR2B)、钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)、精神分裂症断裂基因 1(DISC1)表达的调节作用.方法:构建谷氨酸诱导的HT22 细胞模型,分为模型对照组、温胆汤 20、30、40 g/kg 10%含药血清组、氯氮平0.02 g/kg 10%含药血清组,另设空白对照组.通过CCK-8法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;Real-time PCR法检测细胞miRNA-219、Nr2b、CamkⅡγ、Disc1 mRNA表达;West-ern blot法检测细胞NR2B、CaMKⅡγ、DISC1 的蛋白表达.结果:与空白对照组比较,模型对照组细胞存活率显著降低,凋亡率显著升高(P<0.01),细胞的miRNA-219 表达上调、NR2B、CaMKⅡγ、DISC1 的蛋白和mRNA表达显著下调(P<0.01);与模型对照组比较,温胆汤 20、30、40 g/kg 10%含药血清组和氯氮平 0.02 g/kg 10%含药血清组细胞存活率显著升高,凋亡率显著降低(P<0.01),HT22 细胞CaMKⅡγ的蛋白表达上调(P<0.05 或P<0.01),miRNA-219、CamkⅡγ、Disc1 mRNA表达显著上调(P<0.01),温胆汤30、40 g/kg 10%含药血清组和氯氮平 0.02 g/kg 10%含药血清组NR2B、DISC1 的蛋白表达上调(P<0.05 或P<0.01),细胞Nr2b mRNA表达显著上调(P<0.01).结论:温胆汤可能通过上调miRNA-219、NR2B、CaMKⅡγ、DISC1 的表达,抑制细胞凋亡,保护神经元.
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