黄芪、莪术配伍抑制肿瘤相关成纤维细胞介导的肝癌转移的机制研究
Mechanism of Huangqi(黄芪)-Ezhu(莪术)in Inhibiting Hepatocellular Carcinoma Metastasis Mediated by Cancer-Associated Fibroblasts
摘要目的:观察黄芪、莪术配伍对肿瘤相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)介导的肝癌转移的影响及作用机制.方法:建立条件培养基共培养体系,采用CCK8 法检测细胞增殖;Transwell法检测细胞迁移;ELISA法检测CAFs分泌的CCL5含量;Real time-PCR法检测Mmp2、Mmp9 mRNA的表达;Western blot法检测MMP2、MMP9、CCR5、p-MEK、p-ERK蛋白的表达.将Huh7 细胞、过表达CCL5 的CAFs分别注射到斑马鱼卵黄囊区域,构建斑马鱼肝癌转移模型.采用激光共聚焦显微镜统计尾部迁移的Huh7 细胞数.结果:黄芪、莪术配伍显著抑制CAFs介导的Huh7 细胞迁移(P<0.01),显著降低CCL5 含量(P<0.01),下调CAFs介导的Huh7 细胞中Mmp2、Mmp9 mRNA和蛋白以及CCR5、p-MEK、p-ERK蛋白的表达(P<0.05 或P<0.01).黄芪、莪术配伍显著抑制斑马鱼中过表达CCL5 的CAFs介导的Huh7 细胞迁移(P<0.01).结论:黄芪、莪术配伍能够抑制CAFs介导的Huh7 细胞转移,其机制与抑制CCL5/CCR5/MEK/ERK信号通路有关.
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