地黄益智方保护H2O2诱导的PC12细胞损伤的作用机制

Protective Mechanism of Dihuang Yizhi Formula Against H2O2-Induced Injury in PC12 Cells

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摘要目的:研究地黄益智方对阿尔茨海默病(AD)中H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用,并通过蛋白质组学探讨其对PC12细胞的潜在保护机制.方法:不同浓度的地黄益智方预处理PC12细胞,然后用H2O2诱导氧化应激损伤.试剂盒检测丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.100 mg/mL的地黄益智方处理H2O2损伤的PC 12细胞,质谱分析筛选差异表达蛋白,并对其进行GO富集分析、KEGG富集分析和蛋白互作网络分析.结果:地黄益智方预处理PC12细胞可改善H2O2损伤诱导的SOD、GSH-Px、GR抗氧化酶活性和细胞内GSH的水平降低(P＜0.05,P＜0.01);降低MDA、8-OHdG含量及细胞凋亡(P＜0.05,P＜0.01).地黄益智方作用后,H2O2损伤的PC12细胞有58个差异蛋白表达.相较于模型组,地黄益智方组中有18个蛋白表达发生上调,40个蛋白表达发生下调.差异蛋白涉及调节氧化应激反应、调节蛋白质磷酸化和调节肽反应等生物过程及调控细胞铁死亡通路、线粒体自噬通路等信号通路的表达.地黄益智方可通过调节GPX4、GPX1、Jun等蛋白改善氧化应激诱导的细胞损伤.结论:地黄益智方可以减轻H2O2诱导的氧化应激损伤,筛选出的差异蛋白为探究地黄益智方防治AD的作用机制提供了新的靶点——铁死亡通路.