摘要目的 明确疏肝补肾毓麟汤畅通自噬流,通过PTEN诱导假定激酶1(PTEN-induced putative kinase 1,PINK1)/帕金蛋白(Parkin)通路,调节线粒体功能,提高精子活力的作用机制.方法 通过随机数字表法将SD大鼠分为正常组、模型组、疏肝补肾毓麟汤高剂量组、疏肝补肾毓麟汤低剂量组、五子衍宗丸对照组.采用腺嘌呤(0.05 g·kg-1)灌胃14 d,复制少弱精症大鼠模型.正常组与模型组给予等容0.9％氯化钠溶液,疏肝补肾毓麟汤高、低剂量组给药32.4 g/(kg·d)、8.1 g/(kg·d),五子衍宗丸对照组给药2.6 g/(kg·d).全自动精子分析仪检测精子活力,透射电镜观察睾丸组织中线粒体自噬的超微结构变化、JC-1线粒体膜电位检测试剂盒与流式细胞仪检测线粒体膜电位水平变化、免疫荧光标记线粒体外膜易位酶20(Translocase of the outer membrane of mitochondrion 20,TOMM20)与微管相关蛋白 1 轻链3Ⅱ(Microtubule-associat-ed protein 1 light chain 3Ⅱ,LC3Ⅱ)的共定位、PCR 与 Western Blot 检测睾丸组织 PINK1、Parkin、选择性自噬接头蛋白 62(Se-lective autophagy adaptor protein 62,P62)、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3Ⅱ/Ⅰ)的表达.结果 与正常组相比,模型组的精子活动力下降(P＜0.05),线粒体膜电位比例下降(P＜0.05),线粒体超微结构出现核周聚集,嵴受损或丢失,除了碎裂外,还有暗基质,以及外膜不规则,并且受损的线粒体与包括线粒体吞噬体在内的线粒体空泡相关,免疫双染中发现LC3Ⅱ的存在量明显增多,LC3Ⅱ与TOMM20的双重标记也增加,自噬相关指标PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62的基因与蛋白表达增加(P＜0.05).与模型组相比,疏肝补肾毓麟汤高剂量组、疏肝补肾毓麟汤低剂量组、对照组的精子活动力升高(P＜0.05),线粒体膜电位比例增加(P＜0.05),超微结构下正常形态的线粒体比例明显增多,且线粒体溶酶体的数量也减少,免疫双染中发现LC3Ⅱ的存在量明显减少,LC3Ⅱ与TOMM20的双重标记减少,自噬相关指标PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62的基因与蛋白表达减少(P＜0.05).与对照组相比,高剂量组的线粒体膜电位比例增加(P＜0.05);疏肝补肾毓麟汤高剂量组、疏肝补肾毓麟汤低剂量组超微结构下正常形态的线粒体比例明显增多,且线粒体溶酶体的数量也减少,免疫双染中发现LC3Ⅱ的存在量明显减少,LC3Ⅱ与TOMM20的双重标记减少,自噬相关指标PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62的基因与蛋白表达减少(P＜0.05).结论 疏肝补肾毓麟汤能改善精子活力低下症模型大鼠的精子活动力,可能是通过提高模型大鼠的线粒体膜电位水平,保护线粒体功能,下调PINK1、Parkin、LC3 Ⅱ/Ⅰ、P62的表达,并畅通自噬流,减轻线粒体的过度自噬来发挥作用.