经方丹栀逍遥丸对代谢相关脂肪性肝病小鼠巨噬细胞增殖活性及防炎癌作用的影响及机制研究
Influence and Mechanism of Classical Prescription Danzhi Xiaoyao pill(丹栀逍遥丸)on Macrophage Cytoactive and Anti-Inflammation and Anti-Tumor Effect in Mice with Metabolic Associated Fatty Liver Disease
摘要目的 评价经方丹栀逍遥丸(JF-DZXYW)含药血清对代谢相关脂肪性肝病小鼠巨噬细胞增殖活性及防炎癌转化的调控,并阐述其诱导免疫系统发挥抗炎、抗肿瘤作用.方法 40只体质量18~22 g雄性昆明种小鼠,随机分为对照组(生理盐水组)、JF-DZXYW低剂量组(125 μg/mL)、JF-DZXYW中剂量组(250 μg/mL)和JF-DZXYW高剂量组(500 μg/mL),灌胃0.4 mL/次,1次/d,共3 d.第4天灌胃后行小鼠腹主动脉取血,分离血清.采用CCK-8法检测各剂量组含药血清对小鼠巨噬细胞株Raw 264.7细胞增殖的影响,并筛选出最佳给药浓度.酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测细胞因子:肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、干扰素-β(interferon-β,IFN-β)、白细胞介素-12(interleukin-12p40,IL-12p40)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)含量.运用 MTT 法分析 HepG2 肝癌细胞被巨噬细胞杀伤的效果.结果 小鼠巨噬细胞培养12 h后,JF-DZXYW各剂量组含药血清处理组巨噬细胞增殖速度与对照组相比无显著升高(P>0.05);细胞培养24 h后,JF-DZXYW各剂量组含药血清处理组巨噬细胞增殖速度与对照组相比显著升高(P<0.01).JF-DZXYW中、高剂量组含药血清可显著提升细胞因子TNF-α、IL-1β含量,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);JF-DZXYW低、中、高剂量组含药血清可显著提升细胞因子IL-6含量,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);JF-DZXYW中剂量组含药血清可显著提升细胞因子IL-12p40、IFN-β含量,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);JF-DZXYW高剂量组含药血清可显著提升细胞因子IL-12p40、IFN-β含量,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);JF-DZXYW高剂量组含药血清可显著提升细胞因子IL-10含量,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);JF-DZXYW低、中剂量组含药血清可显著提升细胞因子IL-10含量,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).JF-DZXYW各剂量组含药血清细胞杀瘤率显著升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01).结论 JF-DZXYW可以通过上调巨噬细胞增殖活性、诱导免疫系统发挥抗炎、抗肿瘤作用.
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